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编号:12712567
定量研究石斛醇提取物对酵母朊病毒的治愈作用(2)
http://www.100md.com 2014年4月1日 《生命科学研究》 2014年第4期
     挑取石斛醇提取物治愈酵母朊病毒后的红色菌落活化,接种到YPD液体培养基中30℃培养约16h,到菌液OD600=1.5左右时停止培养,离心收集细胞,加入裂解缓冲液,用珠磨仪裂解细胞,离心收集上清得到蛋白样品;然后采用SDD-AGE/Western blot,首先进行1.5%的琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后用在0℃、恒流0.35A条件下转膜1h,将蛋白转移到PVDF膜上,羊抗Sup35抗体孵育lh,4℃过夜,HRP标记的驴抗羊IgG孵育lh后,洗膜,采用ECL发光试剂盒对其进行放射自显影检测,获得图像信息。

    2结果与分析

    2.1石斛醇提取物和水提取物对酵母朊病毒[PSI+]治愈作用的研究

    酿酒酵母的ade2-1等位基因在ADEl (或ADE2)营养缺陷型标记编码基因的开放阅读框(ORF)(该基因编码酵母合成腺嘌呤途径所必须的ade 1酶)起始处有一个乳白终止密码子。在[PSI+]细胞中,Sup35p聚集形成淀粉样蛋白,导致无义突变抑制,产生终止密码子通读现象,合成腺嘌呤,使[PSI+]细胞在缺乏腺嘌呤的培养基上生长为白色菌落:在[psi-]细胞中 ......
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