3.2无饲养层细胞培养条件

    为了进一步纯化胚胎干细胞以减少日后使用的风险，有学者提出是否能够采用成分明确的物质的组合来彻底替代饲养层细胞的粘附功能及分泌功能，为了解决这个问题，van Hoof等利用基底膜基质(Matrigel)和纤连蛋白(fibronectin)来代替饲养层细胞的功能，同时，利用饲养层细胞条件培养基(feeder conditioned media)跟成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor)维持干细胞的未分化状态，这种方法取得了不错的效果。事实上，这种无饲养层细胞的培养条件能够很好地维持胚胎干细胞的生长及未分化状态，许多实验室现在都采用这种条件培养胚胎于细胞。

    3.3胚胎干细胞的体外培养液体系

    为了避免培养液中所含成分对胚胎干细胞的潜在污染，人们从不同方而做出了努力。首先，在饲养层细胞的培养基方面，人们用成分确定的培养基、细胞因子以及人血清培养人成纤维细胞，得到了不含任何动物源性以及不确定成分的饲养层细胞株。这种方法既保留了饲养层细胞在胚胎干细胞培养过程中的作用，又避免了动物源性成分对胚胎干细胞的污染。胚胎干细胞的培养基方面，传统的培养基中含有FBS (fetal bovineserum) ......