摘 要：蛋白质的o-糖基化(O-glycosylation)是一种重要的翻译后修饰，参与诸多生理和病理过程。目前，对于蛋白质的O-糖基化的研究进展仍非常缓慢，一个重要的原因就是缺乏高效的对O-糖基化蛋白进行分离和鉴定的技术。创新性地将点击化学反应、二维电泳和质谱技术结合，对寻找细胞内0-糖基化蛋白进行了技术探索性研究。首先利用代谢性标记手段，在人肝癌细胞HCCLM6培养基中加入四乙酰化叠氮半乳糖胺(Ac4GaINAZ)对细胞内O-GalNAc糖基化蛋白进行标记：其次通过点击化学将炔基荧光基团连接至标记的O-糖基化蛋白的叠氮基团；应用二维电泳技术对标记蛋白进行分离，并找到13个具有荧光信号的蛋白点；最后对具有荧光信号的蛋白进行质谱鉴定，成功鉴定到7种蛋白，经软件预测后，GRP78蛋白和ANXA1蛋白均具有潜在的0-糖基化位点。这为寻找细胞或生物体中的O-糖基化蛋白奠定了基础，并为高通量筛选O-糖基化蛋白提供技术平台。

    关键词：O-糖基化蛋白；点击化学；二维电泳；质谱技术

    中图分类号：Q599

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2014)05-0377-05

    糖基化是一种常见的蛋白质翻译后修饰 ......