表达绿色荧光蛋白的布鲁氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬细胞过程的差异分析(1)
表达绿色荧光蛋白的布鲁氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬细胞过程的差异分析,绿色荧光蛋白(CFP),激光共聚焦显微镜,流式细胞仪
摘要:通过布鲁氏菌(BrUcella) 16M(强毒株)和M5(弱毒株)进入小鼠巨噬细胞后产生的荧光强度,结合布鲁氏菌胞内生存能力分析二者侵染小鼠巨噬细胞过程的差异,为布鲁氏菌在细胞内的生存繁殖及其分子机制研究提供理论依据。将绿色荧光蛋白(green fluoreseent prolein. GFP)布鲁氏菌16M(强毒株)和M5 f弱毒株)分不同时间段侵染小鼠巨噬细胞(感染复数为100:1),通过胞内生存实验、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察和检测布鲁氏菌侵入RAW 264.7过程的差异 结果表明,布鲁氏菌16M和M5和GFP的l6M和M5侵染RAW264.7的能力不受影响,通过流式细胞仪可以鉴别CFP布鲁氏菌,但是不能确定细菌的存活状。 结合布鲁氏菌16M和M5胞内生存能力分析发现CFP+细胞的增加与活菌培养计数法(colony forming unit,CGU)数量的减少存在一一对应的关系,并且在侵染初期(5~25 min) 16M与M5的荧光强度并没有显著差异。 结果提示,布鲁氏茵16M和M5在侵染进入宿主细胞的初期即侵袭能力并没有明显差异.认为造成毒力差异的主要原因是两者的繁殖能力 ......
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