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编号:12730023
细胞穿透肽Tat—LK15介导siRNA的转染效率和细胞毒性研究(1)
http://www.100md.com 2014年6月1日 《生命科学研究》 2014年第6期
细胞穿透肽Tat—LK15介导siRNA的转染效率和细胞毒性研究,细胞穿透肽(CPPs),Tat-LK15,转染试剂,小干扰RNA
     摘 要:通过与Lipofectamine TM RNAiMAX(Lipo)比较,探讨细胞穿透肽Tal-LK15对人肾上皮细胞(human enbryonic kidney 293T cells,293T)和大鼠视神经节细胞(retinal ganglion cell ling,RGC-5)转染小干扰RNA(smallinterfernce RNA,siRNA)的效率和细胞毒性,为后期实验提供依据。以羧基荧光素(carboxyfluorescein,FAM)标记的siRNA为报告基因,不同剂量的Tat-LK15 (Tat-LK15组)和Lipo(Lipo组)为转染试剂,分别转染293T和RGC-5细胞转染24 h后荧光显微镜观察FAM荧光强度,计算转染效率,并以CCK-8法检测细胞毒性。随着Tat-LK15 和Lipo剂量的增加,siRNA转染效率逐渐提高。 当Tat-LK15与siRNA配比为2:1(μg/μg)时,RGC-5细胞的转染效率达到最高((87.3±4.5)%),低于Lipo与siRNA配比为5:1(μL/μg)时的最高转染效率((96.2±3.2)%(P<0.05));作用于293T细胞时 ......
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