摘 要：以CAT(chloramphenicol acetyltransferase，CAT)为报告基因，构建pCAT2启动子探针我体从绿脓杆菌基因文库中筛选启动子。Sau3A l酶切铜绿假单胞菌的基因组，回收(500—1 500bp)片段并与pCAT2载体连接构建铜绿假单胞菌的基因组文库，PCR鉴定文库的多样性，利用氦霉素(1 0μg/mL)和卡那霉素(50μg/mL)双抗平板筛选了l6株阳性菌株，并用PCR、测序、NCBI比对进行鉴定。构建的基因文厍的厍容鼍可达50 000个，覆盖基因全长的3.5倍，插入率达90%，具有较强的随机性。采用双抗平板进行启动子的筛选，筛选效率高达96%。获得了绿脓杆菌基因组中的9个启动子，同源性达99%以上，并对其活性进行初步鉴定，为铜绿假单胞菌基因表达调控的进一步研究奠定基础。

    关键词：氯霉素乙酰转移酶(CAT)；报告基因；铜绿假单胞菌(PA)；启动子文厍

    中图分类号：R37

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2014)06-0521-06

    氯霉素乙酰转移酶(Chloramphenicol acetyl-transferase ......