睾丸间质细胞在小鼠生精恢复过程中的作用(2)
1材料与方法1.1实验动物
购自军事医学科学院品系为C57近交系成年健康雄性小鼠,饲养在本校动物中心的屏障环境内,自由饮食,环境温度为22~26℃,人工光照周期为12L:12D自动控制。
1.2主要试剂
白消安(busulfan)、DMS0、MTT及氟他胺(flutamide)(美国Sigma公司),Trizol及RT-PCR试剂盒(德国TianGen公司),SYBR Green Assay 试剂盒(日本TaKaRa公司),引物由上海Invitrogen公司设计合成,Gdnf抗体(美国Santa公司),一抗β-Actin(鼠源,中杉公司),EDS由本实验室合成。
1.3小鼠睾丸损伤模型
8周龄雄性C57小鼠60只,25~32g,以溶剂比例(DMS0:水=1:1配制成)4.4mg/mL的溶液,按22mg/kg体重分别给60只小鼠腹腔注射后,随机分成EDS处理组、氟他胺处理组和对照组3组,每组20只。
1.4小鼠LCs去除和氟他胺埋植
EDS处理组在白消安注射3d后腹腔注射100mg/kgEDS ......
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