摘 要：甲羟戊酸激酶是甲羟戊酸途径的关键酶。根据滇龙胆转录组甲羟戊酸激酶基因GrMK序列，设计一对基因特异性引物克隆该基因，并进行序列分析；构建原核表达栽体pGEX-4T-l-GrMK，转入大肠杆菌Rosetta(DE3)，重组蛋白在37 0C、1.0 mmoVL IPTG诱导下成功表达。生物信息学分析结果表明，GrMK蛋白为甲羟戊酸激酶家族成员，具有MK蛋白保守结构域：乳糖激酶/高丝氨酸激酶/甲羟戊酸激酶/磷酸甲羟戊酸激酶(GHMPkinase)N端结构域、C端结构域和ATP结合结构域；GrMK与长春花CrMK亲缘关系最近，原核表达结果表明，融合蛋白相对分子质量与推断大小一致。组织特异性表达分析结果表明Gr MK基因主要在根中表达.这些结果为GrMK蛋白结构和功能的研究奠定基础。

    关键词：滇龙胆：甲羟戊酸激酶；基因克隆；表达分析

    中图分类号：Q786

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2015)03-0196-07

    滇龙胆Gentiana rigescens Frach. Ex Hemsl.是传统中药龙胆品种之一 ......