罗非鱼内脏脂肪酸类化学成分的气相-质谱分析
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【摘要】提取罗非鱼内脏的脂肪油，进行甲酯化处理，利用气相色谱-质谱联用仪进行分析测定。检测出的主要20种脂肪酸，不饱和脂肪酸13种，相对百分含量为80.5%。其中，二十二碳六烯酸(DHA)的相对百分含量为7.6%, 花生四烯酸(AA)的相对百分含量为9.9%，二十碳五烯酸(EPA)的相对百分含量为15.1%。
【关键词】海参；脂肪酸；气相色谱-质谱
【中图分类号】R284
【文献标识码】B
【文章编号】1007-8231(2011)10-1667-02罗非鱼(Tilapia)，俗称非洲鲫鱼，隶属于鲈形目、鲈形亚目、丽鱼科、罗非鱼(亦称丽鲷科，丽鲷属)。罗非鱼为一种中小形鱼。现在它是世界水产业的重点科研培养的淡水养殖鱼类，已成为世界性的主要养殖鱼类。罗非鱼在我国有广泛养殖,产量巨大。
罗非鱼的肉味鲜美，肉质细嫩，含有多种不饱和脂肪酸和丰富的蛋白质，在日本，称这种鱼为“不需要蛋白质的蛋白源”。被认为未来动物性蛋白质的主要来源之一。在加工罗非鱼的过程中，罗非鱼内脏被当做废料丢弃。海洋生物体内通常含有丰富的多不饱和脂肪酸[1，2], 因此，对罗非鱼内脏脂肪酸的研究具有较高的医用和经济价值.
本研究对罗非鱼内脏脂肪酸进行提取，然后进行甲酯化处理，再用气相色谱一质谱联用仪对其进行分析测定，分离鉴定了其中的脂肪酸成分和各组分相对含量。
1实验部分
1.1 仪器及材料
HP 5890 II气相色谱仪(附电子轰击质谱检测器)，甲醇、正丁醇、氢氧化钾为国药集团化学试剂有限公司，均为分析纯。罗非鱼内脏购自广东省广州市。
1.2 色谱条件
色谱柱：弹性石英毛细管HP-5 25m×0.20mm×0.33m；色谱柱温度：198℃恒温3 min，以10 ℃/min升温至248℃，维持12min；进样口温度：280℃；EI-MS检测器温度：280℃；进样方式：分流，分流比30：1；进样量：1 ；载气：氮气。
质谱条件：离子源为电子轰击源；离子源温度230℃ ； 电离电压70 eV； 电子倍增器电压1988 V；发射电流34.6 A；接口温度230℃；扫描范围m/z 20-500。
1.3 实验方法
1.3.1 罗非鱼内脏脂肪油的提取：称取罗非鱼内脏100g剪碎，置于500 mL锥形瓶中，加入100 mL甲醇、50 mL氯仿和40 mL水，电磁搅拌17 h后，加人50 mL氯仿和50 mL水，过滤取下层溶液于250 mL的磨口圆底烧瓶，旋转蒸发回收溶剂，得黄色油状物质.
1.3.2 脂肪酸的甲酯化：取8 mL正己烷于圆底烧瓶中溶解黄色油状物质，加人2 mL0.5 mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，水浴70℃下回流20 min，加入12 mL蒸馏水，超声提取5 min，3 000 r/min离心10 min，取上层有机相用无水硫酸钠干燥后，待GC/MS分析备用.
1.4 分析鉴定
1.4.1 定性分析： 取经1.3.2项处理过的样品0.4 mL，用GC/MS进行分析鉴定.通过G170LBA化学工作站数据处理系统，检索NIST98谱图库，确定样品中各个化学成分。
1.4.2 定量分析：通过G170I BA化学工作站数据处理系统，选取峰面积占比前20的化合物，按峰面积归一化法进行定量分析，分别求得20个主要化学成分的相对含量。
2 结果
2.1 样品经过GC/MS分析鉴定，得到罗非鱼内脏脂肪酸甲酯的总离子流图(图1)
2.2 罗非鱼内脏脂肪酸甲酯GC/MS分析结果(表1)
3 讨论
实验结果表明，罗非鱼内脏中主要的20种脂肪酸，饱和脂肪酸7种，相对百分含量为19.5%；不饱和脂肪酸13种，相对百分含量为80.5%。不饱和脂肪酸中单不饱和脂肪酸10种，相对百分含量为47.9%；多不饱和脂肪酸4种，相对百分含量为32.6%。二十二碳六烯酸(DHA)的相对百分含量为7.6%, 花生四烯酸(AA)的相对百分含量为9.9%，二十碳五烯酸(EPA)的相对百分含量为15.1%。
研究表明，多不饱和脂肪酸具有降低胆固醇、降低血液粘稠度、改善血液微循环、增强记忆力和思维能力，能够对心脑血管疾病起到预防作用[3，4，5]。罗非鱼内脏中所含脂肪酸种类丰富，主要为不饱和脂肪酸 ......
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