2.3寡核苷酸(ASO)探针检测法:ASO探针灵敏度高,可以分析样品间的单个碱基变化,最早被用来做遗传性疾病特定突变的检测。本方法将待检DNA样品点在硝酸纤维素膜上,然后与特定的ASO探针杂交,以检测点突变或缺失引起的遗传性疾病。此技术的缺点是必须严格控制杂交条件,否则会出现假阳性或假阴性,另一缺点是成本高[17]。

    2.4RFLP连锁分析法:因突变导致限制性内切酶酶切位点消失或形成,从而导致相应的DNA酶切片段的改变,这在群体中表现为限制性片段长度多态性(RFLP)。当探针跨越酶切位点时[16],可在突变点两侧设计引物,使PCR产物含有该突变序列,也可以通过改变引物序列使扩增产物中产生(或消失)酶切位点。用相应的内切酶对正常产物和突变产物进行水解并电泳分离,从而检测地贫基因。

    2.5基因芯片:根据基因芯片上不同位置所出现的荧光位点颜色及强弱的变化来判断地中海贫血的基因突变类型,与传统方法比较,基因芯片诊断技术在核酸扩增的基础上,采用荧光标记及引物延伸的方法,可提高检测结果的敏感性和特异性,由于基因芯片高通量特点,可将α、β地中海贫血基因诊断在一张芯片上完成,适用于大面积普查[18] ......