广西莪术水提取物对小鼠的急性毒性反应研究
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【摘要】目的:观察广西莪术水提取物对小鼠的急性毒性反应。方法:采用灌胃法给予小鼠1日内最大浓度及最大体积广西莪术水提取物,观察及检测小鼠给药后7d的情况。结果:实验小鼠最大耐受药量为原生药材224g生药/Kg,为成人临床用药最大量的794.3倍,未出现任何毒性反应。结论:广西莪术入水煎剂用药安全无毒性。
【关键词】广西莪术;急性毒性;小鼠
【中图分类号】R-332【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)12-193-2
广西莪术为姜科植物广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F. Liang 的干燥根茎, 具有行气破血、消积止痛的功效,临床常用于血气心痛、饮食积滞、脘腹胀痛、血滞经闭、痛经、跌打损伤。本实验通观察广西莪术水提取物的急性毒性反应,以评价广西莪术水提取物的其安全性,为临床及研究提供依据。
1实验材料
1.1药物广西莪术由广西民族医院药剂科提供,经广西中医学院中药鉴定教研室鉴定为姜科植物广西莪术Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang的根茎,经水提取浓缩成可供小鼠灌胃的最大浓度的稠膏,相当于2.8g生药/mL。
1.2动物清洁级昆明种小鼠,体重18±2g,由广西医科大学实验动物中心提供,动物许可证号:2009A055。
2实验方法
2.1半数致死量实验(LD50)清洁级昆明种小鼠20只, 雌雄各半,动物禁食不禁水12小时后,按体积0.4ml/10g灌胃给药(广西莪术水提取物2.8g生药/mL),灌胃后常规饲养,观察小鼠死亡情况。如果小鼠大于半数量死亡,则调整减少给药剂量重复实验,直至找到实验小鼠半数死亡时的给药剂量范围。
2.2最大耐受量试验清洁级昆明种小鼠40只, 雌雄各半,随机分空白对照组(A)和广西莪术实验组(B),每组20只。小鼠禁食不禁水12小时后给药,B组按体积0.4ml/10g灌胃给药(广西莪术水提取物2.8g生药/mL)两次,两次间隔6小时,间隔期禁食不禁水,A组则给予等体积的生理盐水,给药后动物正常饮食。连续观察小鼠7d后处死尸检,观察各鼠主要脏器(肝、心、脾、肺、肾),看是否有任何异常改变。
2.3观察项目LD50实验观察小鼠死亡情况,最大耐受量试验则在小鼠给药前和给药后的第1、3、5、7d监测小鼠体重变化,并观察小鼠的行动,反射活动,饮水量,大、小便,存活情况等。
2.4实验数据结果及统计学处理实验计量资料以-x±S表示, 用组间t检验异显著性,用统计软件SPSS13.0处理,P>0.05时表示组间比较没有显著性差异。
3实验结果
3.1LD50结果最大体积最大浓度的广西莪术水提取物给药后,小鼠活动、精神状态、饮食正常,7d内未见小鼠死亡及其它异常发生,因受试药物浓度和体积的限制,所以一次给药无法测出LD50。处死小鼠后尸检,观察各鼠主要脏器(肝、心、脾、肺、肾)未发现任何异常改变。因此,无法测出该中药的半数致死量(LD50),改做小鼠最大耐受量试验。
3.2最大耐受量试验结果结果小鼠无一死亡,在第2次给药后,B组小鼠停止进食,活动减少,但第2d起能恢复正常进食,活动也无异。所有小鼠体重有所增长,毛色光亮,皮毛无疏松,口、眼、鼻、耳无异常分泌物,大小便正常。7d后处死动物,肉眼剖检心、肝、脾、肺、肾、胃肠等重要脏器,结果均未见异常改变,对照组和实验组体重比较无显著性差异(P>0.05)。见表1、表2
表1 广西莪术水提取物最大耐受量试验小鼠反应情况
Tab 1.activite of mice with maximally tolerated dose Curcuma extract
组别性别n四肢活动体毛引水粪便尿液死亡
A组雄10----------0
雌10----------0
B组雄10----------0
雌10----------0
注:-- 代表正常
4讨论
莪术中主要含有挥发油、姜黄素以及多糖类成分,药理作用主要表现为抗肿瘤、抗病毒、保肝、抗肝纤维化、抗炎镇痛等方面[1][2][3],这些报道多集中在莪术油上。莪术在临床应用上多入汤剂,汤剂是中药治病的主要剂型,具有易吸收,疗效快,并能结合辨证施治,随证加减,全面兼顾的优点,莪术入汤剂煎煮时则不可避免的有挥发油流失,但莪术水提取液中尚含有姜黄素类化合物、多糖、β-谷甾醇、棕榈酸及多种微量元素等成分[4],研究表明,莪术水提液还具有免疫调节、抑制血小板聚集的功能[5] [6],水提醇沉液对体内
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血栓有显著抑制的作用[7]。广西莪术为广西产大宗中药材,所以,通过对广西莪术水提取液的急性毒性研究,对于指导临床中医师掌握莪术入药用量具有积极的指导意义。
文献报道广西莪术的乙醇提取物小鼠口服的LD50为86.8±12g生药/Kg[8],在本实验中,广西莪术水提取物LD50未能测出,而其一日内分两次给药于小鼠的最大给药量为224g生药/Kg,为成人临床用药最大量的794.3倍(按70Kg成人最大用药量为每天20g计算)。实验组动物与空白对照组动物在七天内行的、体重增长等方面没有显著性差异,毛色,皮毛,口、眼、鼻、耳无异常分泌物及大小便等也属正常范围,7d后处死动物,肉眼剖检心、肝、脾、肺、肾、胃肠等重要脏器,结果均未见异常改变。按体重计算,如果小鼠1d内能够承受的最大给药量相当于成人临床日用量的100倍以上时,则认为该药比较安全[9],本实验结果表明广西莪术入水煎剂用药是比较安全的,从而为临床中医师掌握莪术入药安全用量提供了实验依据。 ......
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