研究新疆哈萨克传统药柯孜木克颗粒对尿路感染的影响
http://www.100md.com
2010年9月1日
 |
| 第1页 |
参见附件(1486KB，2页)。
【摘要】目的:研究柯孜木克颗粒的体内外抗菌作用。方法:采用试管连续稀释法和K-B法,通过测定最小抑菌浓度(MIC),最小杀菌浓度(MBC)和抑菌圈直径来观察其体外抑菌效果,建立尿路感染动物模型,观察其体内抗菌效果。结果:柯孜木克颗粒对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌,福氏痢疾杆菌在体外有较强的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌,福氏痢疾杆菌在体外有杀菌作用,对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌有抑菌圈,但对绿脓杆菌无效。对尿路感染有明显的抑制作用,与对照组比较,有显著性差异。结论:柯孜木克颗粒在体内外都有较强的抑菌和杀菌作用。
【关键词】柯孜木克颗粒;最小抑菌浓度;尿路感染
【中图分类号】R29【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)18-126-2
尿路感染是多种微生物在机体内尿中生长繁殖,并侵犯尿路粘膜或组织所引起的感染。根据国内统计,尿路感染占泌尿系统疾病首位,约42.9%[1]。在致病菌的作用下,尿路内大量微生物繁殖而引起的尿路炎症,病情反复,缠绵难愈,且大量抗生素的应用往往效果不佳,其副作用亦给患者带来了极大痛苦。
柯孜木克颗粒是新疆哈萨克民族传统医药研究的验方,组方为黑果越菊、沙生蜡菊、木贼等药材。据哈萨克医学文献记载及哈医临床研究结果证实:柯孜木克颗粒可用于尿道感染、膀胱炎、肾盂肾炎和肾病综合症、前列腺肥大、小便不畅等,也可用作全身强壮剂。我们的前期研究证明本方具有较好的抗炎、提高机体的免疫力、增加尿量等作用。在此基础上我们进一步研究了其体内外抗菌作用,研究报道如下。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1实验动物Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重170～
190g,由新疆医科大学实验动物科提供,许可证号:SCXK(新)2003-OOO1。
1.1.2菌种金黄色葡萄球菌、(ATCC 25923),大肠杆菌、(ATCC 25922),变形杆菌、(ATCC 25921),绿脓杆菌、(ATCC 27853),福氏痢疾杆菌、(ATCC 51573),购自中国北京药品生物制品检验所。
1.1.3药品与试剂柯孜木克颗粒(新药制字Z20050112)由新疆阿勒泰地区哈医医院提供。三金片(国药准字Z45021645)是桂林三金药业股份有限公司产品。
1.1.4仪器菌种培养基:本院微生物教研室提供。
1.2方法
1.2.1按试管连续稀释法进行[2],每排第1管用无菌肉汤将柯孜木克颗粒作1:4稀释,然后再对倍稀释,每管1ml,每排最后1管加肉汤培养基作为阴性对照,三金片作为阳性对照,然后在每排试管里各加经1:1000稀释6h培养菌液0.05ml,37℃孵箱内培养24h后测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。
1.2.2采用K-B法,经1:1000稀释6h培养菌液涂布于培养基的表面,柯孜木克颗粒用无菌蒸馏水作1:4稀释(250mg/ml)后,用无菌滴管滴到管碟内,阴性对照组用生理盐水阳性对照组为三金片,37℃孵箱内培养74h,然后观察对固体培养基抑菌圈直径。
1.2.3感染动物模型的建立[3]取体重170～190g的60只wistar大鼠,雌雄各半,大鼠禁水观察12h备用,用1%的戊巴比妥纳麻醉,下腹部剪去毛,用碘酊和乙醇分别消毒后,用棉线活扣结扎尿道口,在下腹部正中切开1.5cm切口,用4、5号小针头抽取大肠菌液(将复苏后菌种再次转种于营养肉汤培养基中,37℃孵育18h后再用麦氏比浊法调整浓度为3×106cfu/ml菌液)0.75ml缓慢注入膀胱,缝合切口,6h后松解尿道口棉线,恢复正常饮食、饮水。假手术组手术中不注入大肠杆菌,注入生理盐水,手术过程同上,活扣结扎尿道口6h后松解,恢复正常饮食供水。
1.2.4分组及给药将造模大鼠随机分为6组,每组10只,即假手术组(辅料)、模型组(辅料)、三金片治疗组(3.675g/kg),柯孜木克颗粒高剂量组(1.6g/kg)、中剂量组(0.8g/kg)、低剂量组(0.4g/kg),造模10d后,用药组开始给药,用药组连续灌胃给药15d,每日1次。给药25d后,给予相应处理做尿分析,尿培养,大鼠肾脏带菌剖面百分率测定等指标地检查。即给药25d后,切开大鼠腹腔用无菌的真空采血管取尿液,分别作尿液分析和尿培养。尿液分析结果记录:白细胞>+或有脓球者均记为阳性,少许或无白细胞记为阴性。尿培养结果记录:细菌计数>10万记为阳性,细菌计数<5千记为阴性。将已处死的大鼠,在无菌条件下取双侧肾脏,纵切后将剖面盖印于平皿琼脂培养基上,37℃培养18h后,记录有活菌存在的肾剖面数,求出各组大鼠肾脏带菌剖面百分率。
2结果
2.1体外抗菌活性MIC和MBC的测定
表1实验结果表明,柯孜木克颗粒对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度比三金片的最小抑菌浓度大一倍,对大肠杆菌的最小抑菌浓度比三金片的最小抑菌浓度小四倍,对变形杆菌和福氏痢疾杆菌的最小抑菌浓度与三金片的相等,但是在1000mg/ml浓度以下对绿脓杆菌没有抑菌作用。
表2实验结果表明柯孜木克颗粒对金黄色葡萄球菌和变形杆菌的最小杀菌浓度比三金片的最小杀菌浓度大一倍,三金片在1000mg/ml浓度下对大肠杆菌没有杀菌作用,柯孜木克颗粒浓度500mg/ml时就有杀菌作用,柯孜木克颗粒和三金片对福氏痢疾杆菌的杀菌浓度一样1000mg/ml,但是柯孜木克颗粒在1000mg/ml浓度以下对绿脓杆菌没有杀菌作用。
2.2对固体培养基抑菌圈直径的影响表3结果表明,柯孜木克颗粒和阳性对照三金片对福氏痢疾杆菌,绿脓杆菌没有产生抑菌圈,但是柯孜木克颗粒对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌产生的抑菌圈直径比三金片的大。
2.3对尿路感染大鼠尿液分析的影响
表4结果表明,柯孜木克颗粒高剂量组、中剂量组,与模型组和三金片组比较,明显减少尿路感染大鼠尿液中的白细胞的含量。
(尿液分析结果记录:白细胞>+或有脓球者均记为阳性,少许或无白细胞记为阴性)
2.4对尿路感染大鼠尿培养的影响
表5结果表明,柯孜木克颗粒高剂量组、中剂量组对泌尿道感染细菌有明显的对抗作用。
(尿培养结果记录:细菌计数>10万记为阳性,细菌计数<5千记为阴性)
2.5对尿路感染大鼠肾脏带菌剖面百分率测定
由表6结果表明,柯孜木克颗粒各剂量组小鼠带菌肾剖面百分率均低于模型组,高、中、低剂量组与肾感染模型组比较有统计学意义(P<0.01)。
3讨论
近年尿路感染作为多发病症,众多医者在临床上亦不断探求有效的治疗法则和方药,形成了很多新的观点。抗生素面世大大提高了尿路感染治愈率,改善患者预后,但尿路感染长期用抗生素及磺胺类药物治疗不但降低人体的免疫力,还易引起菌群失调。因此探讨中医药对尿路感染的治疗有其意义所在,尿路感染是各种病源菌在尿路繁殖而引起炎症反应。在感染的细菌中最常见的致病菌是大肠杆菌,占急性感染的80-90%,其次是福氏痢疾杆菌、变异杆菌、克雷白氏杆菌、葡萄球菌等 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1486KB，2页)。