不同长春花中3种生物碱的含量测定(2)
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本研究利用RP-HPLC[8]方法对收集到的10种长春花品种中的文多灵、长春质碱和长春碱的含量进行分析，以期获得长春花类生物碱含量高的品种。
1 仪器与试剂
11 仪器 Waters高效液相色谱仪，包括Waters Alliance 2695 Separation Module、2996 Photodiode Array Detector、Empower Pro 色谱工作站(美国Waters公司)；DL-720B型超声水浴(上海之信仪器有限公司)；DHG-9075A型恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)；Sarrorius BS210S 型电子天平(德国赛多利斯仪器公司)； PHS-3TC型pH计(上海天达仪器有限公司)；Ultrapure uvf纯水仪(上海和泰仪器有限公司)；Zx-98-1 2lc型旋转蒸发仪(上海鲁伊工贸有限公司)。
12 试剂 文多灵批号2182-14-1，2100-2011；长春质碱批号2468-21-5，10605-2011；长春碱批号143-67-9，9011-2010，购自上海同田生物技术股份有限公司。甲醇、乙腈为色谱纯， 二乙胺、磷酸为分析纯，水为高纯水。
13 材料 本实验选用长春花购于美国泛美种子公司，包括太平洋系列品种5种，清凉系列品种2种，大力神系列品种3种。10种长春花药材均种植于上海交通大学农业与生物学院农场。采用温室大棚种植，温度保持在20℃以上。于8月采集样品，每个品种随机选取3株，收集植株的叶子，于50℃烘干至恒重，磨成干粉；准确称量干粉各05g，将同一品种的3份干粉混合均匀后保存于4℃冰箱备用。
2 实验方法
21 标准品的配制 精密称取三种标准样品各10mg，于10ml容量瓶中用甲醇溶解，超声20min使之溶解后，定容至刻度，浓度为1mg/ml。经04μm微孔滤膜过滤后保存于4℃冰箱。使用时根据需要用色谱纯甲醇稀释。
22 测试样品的制备方法的选择
221 提取溶剂的选择 准确称取同一样品3份，每份200mg，置5ml容量瓶中，分别精密加入氯仿、甲醇、05%乙酸水溶液50ml，超声(功率600W，频率99 kHz)提取30min，放冷，分别补加相应溶剂至刻度 ......
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