三种除蛋白方法对复方乙肝宁多糖及蛋白的影响(2)
2-2 乙肝宁复方多糖含量测定方法的建立2-2-1 6%苯酚溶液的配制 量取苯酚6ml,加蒸馏水定容至100ml,置棕色瓶内,放于4℃冰箱备用。
2-2-2 标准溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖20-20mg,用蒸馏水溶解定容至100ml,摇匀,即得0-2020mg/ml的葡萄糖标准溶液。
2-2-3 最大吸收波长[2]的确定 取葡萄糖标准溶液1ml,加入具塞试管中,迅速加入6%苯酚溶液1-0ml,浓硫酸5-0ml,摇匀,室温放置5min,沸水浴15min,流水速冷至室温。以蒸馏水同法操作为空白,置比色杯中于400~700nm波段处进行扫描,光谱扫描曲线确定最大吸收波长为490nm。(见图1)
2-2-4 标准曲线的建立 采用苯酚-硫酸法,用移液枪分别吸取0-0、0-5、1-0、2-0、3-0、4-0、5-0ml葡萄糖标准液至10ml容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度。摇匀后,用移液枪分别吸取1ml加入具塞试管中 ......
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