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编号:12857163
土家族麝针疗法对缺血性脑中风大鼠的脑保护作用机制研究(3)
http://www.100md.com 2016年5月1日 《中国民族民间医药·下半月》 2016年第5期
     1243血清细胞因子IFN-β和TNF-α的含量检测分别于治疗前和治疗3疗程结束后2h,随机抽取各组大鼠6只,颈动脉取血,置于离心管中,37℃静置待其凝固后,3000rpm离心10min,取上清液,即得血清,-80℃保存。采用ELISA法测定各组大鼠血清中IL-2和IL-4的含量。取冻存的血清,4℃下融化,待测;在标准品孔中加入不同浓度标准品50μl,待测样品孔加入血清样本50μl,再分别加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体100μl,封板膜封住反应孔,37℃恒温孵育1h,弃去液体,吸水自拍干后加入洗液静置1min,甩去水液,吸水纸上拍干,重复洗板5次;另设空白孔不予处理作为对照。所有孔加入底物A、B各50μl,37℃恒温避光孵育15min。所有孔加入终止液50μl,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

    1244NF-κB p65的表达情况取颈动脉取血的大鼠,10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧位固定,迅速打开胸腔,暴露心脏,剪开右心耳,向左心室注射冷09%生理盐水,观察到大鼠眼球和肺逐渐变白,且右心耳流出无色液体时,改为灌注pH74的4%多聚甲醛缓冲液,固定,立即断头取脑 ......
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