HPLC法同时测定生发片中二苯乙烯苷和特女贞苷的含量(2)
2.2.3 阴性对照溶液的制备 按照生发片的制备工艺,分别制备不含何首乌和女贞子的阴性样品,参照供试品溶液的制备方法同法操作,制备阴性对照溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 系统适用性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液,按照“2.1” 项下的色谱条件进行试验。记录色谱图,理论塔板数按二苯乙烯苷峰计不低于6000,按特女贞苷峰计算不低于7000;二苯乙烯苷和特女贞苷与其他组分的分离度均>1.5;供试品溶液中二苯乙烯苷和特女贞苷的色谱峰与对照品溶液一致,阴性对照无干扰。结果见图1。
2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取“2.2.1”项下的对照品储备液0.2、0.3、0.5、1、2、3ml,置25ml容量瓶中,加70%甲醇定容至刻度,按“2.1”项下的色谱条件进行测定,以混合对照品的进样量(mg)为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得到二苯乙烯苷的回归方程为Y=3787.6X+1.4319,r=0.9999;特女贞苷的回归方程为Y=985.26X+5.5701 ......
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2.3 方法学考察
2.3.1 系统适用性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液,按照“2.1” 项下的色谱条件进行试验。记录色谱图,理论塔板数按二苯乙烯苷峰计不低于6000,按特女贞苷峰计算不低于7000;二苯乙烯苷和特女贞苷与其他组分的分离度均>1.5;供试品溶液中二苯乙烯苷和特女贞苷的色谱峰与对照品溶液一致,阴性对照无干扰。结果见图1。
2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取“2.2.1”项下的对照品储备液0.2、0.3、0.5、1、2、3ml,置25ml容量瓶中,加70%甲醇定容至刻度,按“2.1”项下的色谱条件进行测定,以混合对照品的进样量(mg)为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得到二苯乙烯苷的回归方程为Y=3787.6X+1.4319,r=0.9999;特女贞苷的回归方程为Y=985.26X+5.5701 ......
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