金匮肾气丸对自然衰老大鼠逼尿肌细胞M3R、β3—ARmRNA及其蛋白表达的影响(2)
1.3 仪器 TL-4显微镜(Olympus公司);ABI实时定量PCR仪(爱普拜斯应用生物系统贸易有限公司);电泳装置和转膜装置(美国Bio-Rad);IB高速低温离心机(德国eppendorf公司);AS图像分析系统(德国Kontron elekronik公司);核酸蛋白分子仪(德国Beckman公司);脱色摇床(江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司);JA1203N型电子天平(上海精密仪器有限公司)。
1.4 主要试剂 DMEM、双抗、胎牛血清、Ⅳ胶原酶、胰酶均为美国GIBCO公司产品; D-hank、PBS均为上海吉诺生物公司产品;总RNA抽提试剂Trizol(美国MRC公司);逆转录试剂cDNA试剂盒、实时荧光定量PCR试剂、细胞裂解液、PrestainTM蛋白质预染Markers均为加拿大Fermentas公司产品;M3R、β3-AR、GAPDH引物由上海生工生物有限公司提供;BCA蛋白定量试剂盒、SDS、考马斯亮蓝R250均为广州美津生物技术有限公司产品;SDS-PAGE凝胶配制试剂盒、SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液均为武汉博士德公司产品;DEPC、甘氨酸、Tris、甘油、溴酚蓝、Tween-20均为美国Amresco公司产品;脱脂奶粉(广州斯佳生物科技有限公司);Rabbit Anti-PKA抗体(美国upstate公司);H-89、Goat anti-Rabbit IgG(H+L)HRP、immobilonTM western、Immobilon-P PVDF膜均为美国millipore公司产品;β-actin抗体(美国santa公司) ......
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1.4 主要试剂 DMEM、双抗、胎牛血清、Ⅳ胶原酶、胰酶均为美国GIBCO公司产品; D-hank、PBS均为上海吉诺生物公司产品;总RNA抽提试剂Trizol(美国MRC公司);逆转录试剂cDNA试剂盒、实时荧光定量PCR试剂、细胞裂解液、PrestainTM蛋白质预染Markers均为加拿大Fermentas公司产品;M3R、β3-AR、GAPDH引物由上海生工生物有限公司提供;BCA蛋白定量试剂盒、SDS、考马斯亮蓝R250均为广州美津生物技术有限公司产品;SDS-PAGE凝胶配制试剂盒、SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液均为武汉博士德公司产品;DEPC、甘氨酸、Tris、甘油、溴酚蓝、Tween-20均为美国Amresco公司产品;脱脂奶粉(广州斯佳生物科技有限公司);Rabbit Anti-PKA抗体(美国upstate公司);H-89、Goat anti-Rabbit IgG(H+L)HRP、immobilonTM western、Immobilon-P PVDF膜均为美国millipore公司产品;β-actin抗体(美国santa公司) ......
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