22免疫组织化学取实验大鼠，快速开胸，经左心室主动脉插管，生理盐水快速冲洗后，灌入预冷的4%缓冲多聚甲醛500mL，含025%戊二醛，取脑后固定2～4h，再转入20%蔗糖中，于-70℃冰冻保存。作厚5μm冠状冰冻切片，对含背侧海马的组织切片隔五取一，依次加入含3%正常羊血清中30min(37℃)，001mol/L、PH74 PBS接片，03%(体积分数)甲醇过氧化氢封闭内源性过氧化物酶，03%(体积分数)TritonX100 37℃处理30min，ABB封闭内源性生物素。切片上加入GABA一抗(1∶100)及正常血清，4℃下孵育48～72h，加入二抗室温3h，SABC室温反应2h，DAB/H2O2呈色，明胶贴片，脱水透明，中性树胶封固。PBS代替一抗作为阴性对照。

    3数据处理

    数据均以(x±s)表示，采用SPSS115 统计软件进行方差分析及两两比较进行统计学处理，对3组大鼠各脑区的NA进行单因素方差分析。P<005为差异具有统计学意义。

    4结果

    41大鼠成瘾模型的评定各组在末次注射后12小时将大鼠放入行为学观察记录箱中 ......