2.2 原代小鼠睾丸支持细胞的纯化 原代细胞培养6 h后取出，轻轻摇晃培养皿，将未贴壁及贴壁不牢固的精原细胞游离，吸取丢弃培养液及游离的精原细胞。加入新的培养液。分别于12 h、18 h、24 h重复上述操作。培养至48h，0.25%胰蛋白酶(无EDTA)2 mL加入培养皿中，快速摇匀消化15 s，弃掉胰酶及消化下的剩余精原细胞。加入培养基摇晃清洗3遍后继续至于37 ℃、5% CO2恒温培养箱中培养。72h后重复上述步骤1次。

    2.3 小鼠支持细胞的鉴定

    2.3.1 形态学鉴定 小鼠支持细胞培养6h开始贴壁，12h呈条梭型，24h胞体出现突触，48h细胞进一步铺展呈片状。而精原干细胞则呈现圆形随着培养连接呈圆形串珠样，以此可初步鉴别。

    2.3.2 小鼠睾丸支持细胞的免疫学鉴定 取培养2周支持细胞做鉴定，PBS洗涤2遍，3 min/遍。加入4%多聚甲醛固定20 min后PBS洗涤3遍，3 min/遍。加入4 mL的0.1%Tween-20(PBST)于培养皿10 min透化细胞，PBS洗涤2遍，3 min/遍。加入含5%BSA的PBST(封闭液)封闭细胞45 min ......