加味通幽汤对缺氧条件下食管癌细胞血管生成拟态和增殖的影响(2)
1.3 仪器与材料 96孔细胞培养板(美国Corning公司); 24孔细胞培养板(美国Corning公司); 细胞培养瓶(美国Corning公司); 移液管(gibcol公司); 离心管(gibcol公司); 3MK型低温高速离心机(美国Sigma公司); 1100型无菌超净台(美国Forma公司); 3366型CO2培养箱(美国Forma公司); TMD-2倒置式显微镜(日本Nikon公司); NOVAPATH 450型酶标光度计(美国Bio-Tek公司)。2 方 法
2.1 方药制备 加味通幽汤加入30倍体积的水,浸泡30 min,武火煮沸,文火煎煮40 min,收集药液,入烧杯中浓缩方药至200 mL,-20℃冻存,用时调至所需浓度。
2.2 大鼠血清制备 4~6周龄SD大鼠40只,将其随机分为两组(对照组15只,含药组25只),对照组和含药组分别灌胃0.9%的生理盐水和加味通幽汤。调整加味通幽汤浓度:以标准成人用量为基础,按照大鼠体表面积与人体换算系数,计算大鼠所需生药量(14.2mg/mL),以Milli-Q水调整药液浓度。
两组大鼠灌胃量均为1mL/d ......
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