1.4 仪器 CJ-1D超净工作台(天津泰斯特公司);CO2恒温培养箱(美国Napco公司);电控恒温水浴箱(北京长安科学仪器厂);LD4-2A型离心机(上海医用分析仪器厂); 电子天平(德国OHAUS公司);倒置相差显微镜(日本尼康公司);病理图像分析系统(Motic Med CMIAS);Mini Trans-Blot型蛋白转印系统(美国Bio-Rad公司)。

    2 方法

    2.1 脐血单核细胞的获取 在无菌条件下，取新鲜脐血(肝素抗凝)9mL，加入1倍体积的无血清RPMI1640培养液稀释，吹打混匀后2∶1叠加于淋巴细胞分离液层(淋巴细胞分离液与稀释浓缩脐血比为1∶2)，经密度梯度离心(20℃，2000r/min，20min)，离心后分为血清层、单个核细胞层(白膜层)、淋巴细胞分离液层和红细胞层，小心吸取白细胞层，即为脐血单个核细胞，用RPMI1640培养液离心洗3次，每次1500r/min，10min，去除上清，用含10%胎牛血清的RPMI1640细胞培养液重悬细胞沉淀，加入至75cm2培养瓶中培养3h，收集贴壁的单核细胞进行体外培养。

    2.2 体外培养及倒置相差显微镜观察(采用6孔板 ......