太子参均一多糖对大鼠小肠α-糖苷酶活性影响(2)
2.2.2 酶的提取 大鼠禁食不禁水12h后,脱颈椎处死,立即取出小肠,用冷生理盐水冲洗,翻转小肠后再漂洗,将洗净的小肠置于培养皿上,用载玻片轻刮下小肠黏膜。加入适量的 4℃ pH=6.8的磷酸盐缓冲液,匀浆后于 4℃,20000g/min离心20min,沉淀加适量的 4℃ pH=6.8的磷酸盐缓冲液摇匀后,20000g/min离心20min ,合并上清液,加磷酸盐缓冲液稀释至20mL/每只大鼠,置于-20℃保存备用。2.2.3 底物溶液的配制 精密称取0.01503g 4-硝基-α-D-吡喃葡萄糖苷,加入少量緩冲盐溶液,超声溶解,以缓冲盐溶液定容至25mL。
2.2.4 阿卡波糖溶液的配制 精密称取阿卡波糖12.86mg,加DMSO 50μL超声溶解,纯水定容至10 mL。即得2000μmol/L阿卡波糖溶液 ......
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