水飞蓟宾单用及合用肝龙含药血清对HSC的影响及机制研究(2)
細胞存活率=(OD药物组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组);细胞抑制率=1-(OD药物组-OD空白组)/(OD对照组-OD空白组)。
1.3.4 激光扫描共聚显微镜检测细胞内游离Ca2+的浓度 根据水飞蓟宾单用及联合肝龙含药血清对HSC增殖作用的影响发现,30%水飞蓟宾联合不同浓度肝龙含药血清对HSC的抑制作用较好,故本次研究用激光扫描共聚显微镜检测其对细胞内游离Ca2+浓度的影响。将培养的细胞取出,弃去含胎牛血清培养基,用HBSS溶液洗涤细胞至少3次;在每孔细胞中加入30μL Fluo 3-AM工作液;37℃、5% CO2细胞培养箱内孵育30min,之后除去工作液,为充分洗去工作液,加入HBSS溶液清洗细胞3次,然后每孔加入20μLHBSS溶液覆盖细胞;37℃、5% CO2细胞培养箱内孵育约25min后,用激光共聚焦显微镜来检测细胞内Ca2+的浓度。设置扫描条件:20×倍镜下、激发波长488nm、发射波长525nm,10%激光强度、PMT(1100) ......
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