乌头碱下调miR-23a诱导凋亡抑制胃腺癌细胞系MGC803增殖(2)
1 材料与方法1.1 材料
1.1.1 药物与试剂 乌头碱(批号BBP03866,云南西力生物有限公司):取乌头碱20.3mg,加入1.015mL三氯甲烷,配制成20mg/mL的母液,然后按一定的比例分别稀释成浓度为0、5、10、20、40、60、80、100μg/mL的稀释液备用;三氯甲烷(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司);Lipofectamine 2000(Invitrogen公司,美国);MTT(SIGMA,美国);DMSO(SIGMA,美国)结晶紫(SIGMA,美国); 4%多聚甲醛(北京鼎国,北京);TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(Roche, 瑞士);RPMI-1640培养基(GIBCO, 美国);胎牛血清(GIBCO, 美国);IRF1抗体、GAPDH抗体(天津赛尔生物科技有限公司);SYBR Premix Ex Taq试剂盒(TaKaRa, 日本);Real-time PCR引物(miR-23a forward: 5′TGCGGATCACATTGCCAGGGATTTC3′及miR-23a-3p-Reverse:5′CCAGTGCAGGGTCCGAGGT3′;阴性对照U6 forward:5′TGCGGGTGCTCGCTTCGGCAGC 3′及U6-Reverse: 5′CCAGTGCAGGGTCCGAGGT 3′)購自昆明品品生物科技有限公司 ......
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