天然竹汁中氨基酸含量的测定
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摘 要 以竹子为原料，提取天然竹汁，并用氨基酸自动分析仪测定了竹汁中的氨基酸含量，对其测定的重现性和回收率进行了试验。结果表明，天然竹汁中含有16种氨基酸，含量丰富，其中天冬氨基酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸含量较高，有10mg/100nd以上。可为人体体内合成蛋白质提供原料，并参与体内的代谢，这些物质基础为其在保健和药用作用提供物质上的保证。另外，重现性和回收率试验结果表明，所采用的测定方法准确可靠，要对测定条件的选择必须加以注意。
关键词 天然竹汁 氨基酸 含量测定
中国拥有丰富的竹类资源，目前竹汁的药用和食用价值也为人们所认识。竹汁清澄透明，竹香淡雅，爽口怡人，具有独特的天然性、营养性。竹汁中含有人体所必需的常量、微量元素、多种维生素、分解葡萄糖及近20种游离氨基酸，尤其含有人体无法合成的赖氨酸、组氨酸、冬氨酸、胱氨酸等，能够活化人体细胞，具有抗衰老保健作用，可作为抗氧化剂或保健食品开发原料使用。很多实验证明鲜竹汁具有清热化痰、镇惊开窍、清热宣肺、利咽止咳之功效。
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这些作用来源于竹汁含有多种复杂成分的混合物，尤其是氨基酸的化学成分。本文以广东特有的竹品种——青皮竹作原料，通过压榨的方法提取竹汁的化学成分，并对其各类氨基酸的含量进行了测定，这些实验结果为竹汁的产品开发提取实验依据。
1实验方法
1.1竹汁的提取
(1)选材：选择经过l～5年生长的青皮竹作为原料。
(2)竹材处理：将竹材去枝、去叶、水洗、晾干，备用。
(3)压榨汁：竹材处理后，将备用竹材送入已清洁干净的压榨汁机内，压榨汁得竹汁(竹汁量为竹材的40%～50%)，竹渣作造纸用原料。
(4)分级过滤：将压榨出的竹汁先通过第一级的网筛过滤，除去压榨汁时带来的竹渣、枝条等粗物；再经二级纱网过滤，将竹汁内的一些大颗粒过滤除去；最后经微孔过滤，除去小颗粒，得到淡青色的浓竹汁。
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(5)紫外消毒处理：将竹汁放入装有高强度紫外光的容器中，保持15rain消毒，备用。
1.2仪器
日立835250型氨基酸自动分析仪。
1.3供试样品的制备
精取上述1.1提取的竹汁样品10.OOml，浓缩至hnl左右。样品浓缩液中加入3ml-10ml/L盐酸溶液，再加入lml去离子水，混合均匀后移入10ml的长颈安瓿瓶中，抽成真空封口，于110℃加热水解24h。
水解完毕后放冷，启封安瓿，将水解液移至lOml量瓶中，以高纯水定容至刻度。精密吸取2ml，于50℃真空干燥箱中挥干，反复操作3次后取出，加入lml专用稀释液溶解均匀，以微孔滤膜滤入2ml洁净容器中，待测。
1.4氨基酸测定
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测定条件：层析柱216mm×150mm，离子交换树脂日立2619型；缓冲液流速0.2ml·min-1，泵压90～120kg·cm-2，茚三酮流速0.5ml·min-1；泵压15～35kg·cm-2，柱温55℃，进样量50ul，标准品进样量3nmol/50ul，氧气压力O.28kg·cm-2。测定结果见表1。
1.5重现性和回收率试验
取制备好的样品溶液，按照选定的色谱条件，进样50ul，连续进样4次，根据测定的结果，计算其标准差和变异系数，以4次结果的平均值作为氨基酸的含量。
在上述的测定方法中，加入1.00ml氨基酸标准溶液，测定各种氨基酸的回收率，结果见表1。
2结果与讨论
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天然竹汁中氨基酸的分析结果表明，所含的氨基酸种类较丰富，达16种之多，其中尤以天冬氨基酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸含量为高，前三种氨基酸达到28rag/100ml～46mg/100ml，后三种也有10mg/100ml以上，人体必需的氨基酸含量也很高，这是天然竹汁具有药用和食用价值的基础。氨基酸是人体体内合成蛋白质的主要原料，各种氨基酸必须满足一定的构成比例，缺少任何一种或比例失调，都会影响蛋白质的合成，使人体免疫力下降。另外某些氨基酸还能够参与体内的代谢，同时在基因表达控制方面它和激素一样起着重要的作用，有关天然竹汁中氨基酸含量的多少在保健功效及药用功效上的作用，有待于进一步的探讨。本文的结果为其在保健和药用等方面的应用提供了参考依据。
采用氨基酸自动分析仪测定，控制一定的测定条件，经重现性和回收率试验结果表明，其标准差、变异系数和回收率都较好(见表1)，所用的测定方法准确可靠，可用于竹汁氨基酸的测定方法。但要注意层析柱的大小、离子交换树脂类型、缓冲液流速、泵压、茚三酮流速、柱温、进样量、氧气压力等测定条件的选择。
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参考文献
1张佐玉，张喜.竹子在中医药和保健品开发中的潜力.中药现代化，2000，2(3)：54
2国家药典委员会.中华人民共和国药典一部.北京：化学工业出版社，2000：268
3中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准·中药材第一册.北京：人民卫生出版社，1991：99
4浙江省卫生厅.浙江省中药炮制规范.杭州：浙江科学技术出版社，1994：345
5江苏新医学院.中药大辞典(上册).上海：上海科学技术出版社，1997：898
(收稿日期：2006年11月18日), 百拇医药(罗一帆)