核糖体失活蛋白的研究应用进展(2)
2002年傅明辉和田洁报告了苦瓜籽核糖失活蛋白的分离纯化及抗氧化活性的研究,[10]用改进的苦瓜籽核糖体失活蛋白的提取工艺:苦瓜籽经粉碎,乙酸提取,离心,调节至PH7.6,再离心,加固体(NH4)2SO4至90%饱和,静置,离心收集沉淀,溶于磷酸缓冲液(PBS,PH7.0),并对之透析后,浓缩。此粗提取液上CM32柱,以50mmol/l NaCl-5mmol/l PBS洗脱至基线,然后以250ml含50~250mmol/l NaCl的5mmol/l PBS(PH7.0)进行梯度洗脱,分部收集,合并4~6管为组分A,脱盐浓缩后上Sephadex G-75柱纯化以PBS(7.0)洗脱,分部收集(20~30管)为峰4,经测定为29.65D。2004年王宾香等报道了阴阳离子交换色谱在灌注色谱工作站上串联,分离得α-MMC和β-MMC[11]。
200g苦瓜籽去壳磨碎,加入500ml 2mmol/l PBS(PH7.2,含0.2mol/l NaCl),于4℃搅拌提取4h后,再于4℃离心(10 000r/min)10min ......
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