高效液相色谱法测定小儿止咳糖浆橙皮苷的含量
 |
 |
 |
【摘要】:目的:建立小儿止咳糖浆橙皮苷的含量测定方法｡方法:采用高效液相色谱(HPLC)法｡色谱柱为LanboKromasil C18 柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-醋酸-水(35∶4∶61),流速1.0mL•min-1,柱温:30℃,检测波长283nm｡结果: 橙皮苷进样量在0.08192~0.8192μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999), 平均加样回收率为98.33% (RSD=0.82%,n=6)｡结论:该方法灵敏,准确,稳定,重现性好,适用于该制剂的质量控制｡
【关键词】:小儿止咳糖浆 橙皮苷 高效液相色谱法 含量测定
【中图分类号】R284.1;R286.0 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517(2008)07-0031-02
小儿止咳糖浆犤1犦是甘草流浸膏､桔梗流浸膏､氯化铵､橙皮酊四味组成,具有祛痰,镇咳的作用,用于小儿感冒引起的咳嗽｡临床效果较好,因此临床上得到了非常广泛的应用｡《卫生部药品标准中药成方制剂第五册》小儿止咳糖浆项下只规定了氯化铵的含量测定,作者建立了橙皮苷的高效液相色谱定量分析方法,旨在为小儿止咳糖浆的内在质量控制提供一种有效的依据｡
, 百拇医药
1仪器与试药
1.1 仪器
LC-10ATvp型高效液相色谱仪,SPD-10Avp检测器(日本岛津)｡
1.2试药
橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110721-200512,供含量测定用);甲醇､醋酸均为色谱纯,水为超纯水;其他试剂均为分析纯｡
1.3小儿止咳糖浆(怀化正好制药股份有限公司批号070901､071201､080301 )｡
2方法与结果
2.1色谱条件犤2犦
, 百拇医药
色谱柱: LanboKromasilC18 柱(250mm×4.6mm, 5μm); 流动相: 甲醇-醋酸-水(35∶4∶61);流速:1.0mL•min-1;柱温:30℃;进样量为10μL;检测波长为283nm｡
2.2溶液的制备犤2犦2.2.1 供试品溶液的制备精密量取本品10mL,30分钟,放冷,用50%甲醇稀释至刻度, 摇匀,滤过｡精密量取续滤液3mL,置10mL容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过｡即得｡
2.2.2对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷为干燥剂减压干燥18小时的橙皮苷对照品10.24mg, 置50mL量瓶中,50%甲醇使溶解, 并稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置25mL量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得｡
2.3方法学考察空白干扰试验: 取除橙皮酊的其余几味药,按该相同的制备工艺和处方比例制备阴性制剂,按照2.2.1项下供试品溶液制备方法制备阴性对照
, 百拇医药
图1 小儿止咳糖浆高效液相色谱图a样品b对照品c阴性对照溶液｡取橙皮苷对照品溶液､阴性对照溶液和供试品溶液,依法测定,结果见图1｡可见,样品中其他成分对测定无干扰｡线性关系考察: 取上述橙皮苷对照品溶液,精密吸取2､4､8､10､15､20μL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积积分值,以浓度为横坐标(X), 以峰面积积分值为纵坐标(Y),绘制标准曲线,得回归方程为Y=-277.01X+1.055×106 r=0.9999(n=6)｡结果表明,橙皮苷进样量在0.08192μg~0.8192μg范围内具有良好的线性关系｡
1.3%｡表明供试品溶液在8h内基本稳定｡加样回收率试验:精密量取已知含量的样品(批号为080301)5ml,分别精密加入一定量的橙皮苷对照品溶液(0.3725mg/mL),按供试品溶液制备方法操作,计算回收率,结果见表1｡
, http://www.100md.com
2.4样品含量测定
按2.2项下供试品溶液制备方法处理3批样品｡精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μL,注入液相色谱仪中,记录峰面积,以外标法计算含量,结果见表2｡
3讨论
3.1该药为四味复方中药,所含成分较多,已有精密度试验:精密吸取对照品溶液10μL,按上述条件重复进样5次,依法测定,结果峰面积的RSD为0.79%,不超过0.9%,说明仪器精密度良好｡
重现性试验: 取同一批号样品(批号为080301) 按“2.2.1” 项下方法制备供试品溶液｡平行测定6次｡结果平均峰面积为468967,RSD为1.2%｡
稳定性试验: 取同一对照品溶液, 于0､1､2､3､4､5､6､7､8h分别进样1次,依法测定橙皮苷峰面积,结果峰面积无显著变化,RSD为RP-HPLC法测定其甘草流浸膏中甘草酸单胺盐的含量以控制药品质量的报道,对于其中橙皮酊的质量控制则未见报道｡
, 百拇医药
3.2溶剂的提取笔者曾用乙醇､甲醇､50%甲醇做溶剂,以50%甲醇提取最完全,且橙皮苷峰形良好; 超声处理时间分别采用20分钟､30分钟､40分钟,结果20分钟提取的含量低于30分钟,30分钟与40分钟提取无明显差别,故选用超声30分钟提取｡
3.3小结:本法样品预处理简单,回收率高,重现性好,稳定性好｡处方中其他成分对测定无干扰,可以有效控制该制剂的质量｡
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部.药品标准.中药成方制剂第五册[S].北京:人民卫生出版社,1992:19.
[2]国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部) [S].北京:化学工业出版社,2005:132 附录31､33.
(收稿日期:2008.4.2), 百拇医药(项 菲 肖 燕)