升红颗粒的提取纯化工艺研究(2)
2.1.3 样品中儿茶素的含量测定 按正交试验设计各次实验规定的条件制备样品,精密量取规定体积的样品液,置蒸发皿中水浴蒸干,用流动相溶解,过滤后定容于25ml容量瓶,过0.45μm微孔滤膜后进样20μl测定峰面积,代入回归方程计算儿茶素的进样量,换算成鸡血藤和花生红衣药材总量中儿茶素的含量。2.2 络合-分光光度法测定总黄酮含量[5-6]
2.2.1 标准曲线的制备 精密称定芦丁对照品约10mg,用50%的乙醇定容于50ml容量瓶,制成对照品溶液(0.1830mg/ml)。精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml分别置于25ml容量瓶中,各加50%乙醇使成5ml,再各加5%亚硝酸钠溶液1.0ml,摇匀,放置6min,各加10%硝酸铝溶液2.0ml,摇匀,放置6min;再各加4.3%氢氧化钠试液10ml,分别用50%乙醇稀释至刻度,摇匀,放置15min,制成待测对照品溶液。以第一瓶为空白对照,在510nm处测定各浓度对照品溶液吸光度,以吸光度(A)对浓度(C,mg/ml)进行线性回归,得回归方程C=0.0811A-0.0012(r=0.9995),线性范围为0.0183-0.0915mg/ml ......
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