PLC法测定参芪健胃颗粒中阿魏酸含量
【摘 要】 目的：测定参芪健胃颗粒中阿魏酸的含量，为参芪健胃颗粒的质量研究提供依据。方法：采用高相液相色谱(PLC)法测定参芪健胃颗粒中阿魏酸的含量；使用CAPCELL PAK C18(4.6 mm×20mm，μm)色谱柱；以乙腈-0.08%磷酸(17∶83)为流动相，流量1.0 ml/min。结果：建立了PLC法测定参芪健胃颗粒中阿魏酸的含量，阿魏酸进样量在0.0134～0.2708μg( r=0.9999)范围内，线性关系良好，平均回收率为97.8%，RSD=1.0%(n=6)。结论：该方法准确、重复性好，可用于参芪健胃颗粒的质量控制。
【关键词】 PLC；参芪健胃颗粒；阿魏酸
【中图分类号】 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-817(201)1-0017-02
参芪健胃颗粒收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十册，由党参、当归、黄芪等十四味药材加工制成。具有温中健脾、理气和胃之功效。主治脾胃虚寒型的慢性萎缩性胃炎、适用于胃脘胀痛、痞闷不适、喜气喜按、嗳气呃逆等症。原标准中只有性状、鉴别和检查项，无其他检定方法。为控制参芪健胃颗粒的质量，本文参考有关文献，采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography，PLC)法对处方中当归的有效成分阿魏酸的含量进行了测定，经方法学验证，结果较为满意，为参芪健胃颗粒定量指标提供了依据。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 实验仪器 岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(包括LC-2010型紫外检测器；LC Solution色谱工作站)；CPA22D型电子天平(十万分之一)；BSA224-CW型电子天平(万分之一)。
1.2 试剂与试药 乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为超纯水；阿魏酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110773-201313)；参芪健胃颗粒(河南辅仁堂制药有限公司，批号：201311421、201403232 、201411111)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱CAPCELL PAK C18(4.6 mm×20 mm， μm)；流动相：乙腈-0.08%磷酸(17∶83)；柱温：3℃，体积流量：1.0 ml/min；检测波长316 nm；对照液和供试品液进样量均为10 μl。理论板数：按阿魏酸计算理论板数不低于000；分离度大于1.，外标法计算含量。
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2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取对照品12mg，置100ml量瓶，加入70%甲醇适量使溶解，标定至刻度，摇匀。精取ml置0ml量瓶，70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.2 供试品溶液 取装量差异下供试品适量，研细，精密称定1.8g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，密塞，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液经0.4μm滤膜滤过，即得。
2.2.3 阴性对照液 按照处方制法制备缺少当归的模拟样品，同供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 阴性干扰实验 取“2.2项下3种溶液各10 μl，分别注入高效液相色谱仪测定。结果阴性对照液色谱图中在阿魏酸峰对应的保留时间附近未检出干扰峰(图1)。
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2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1、、10、1、20μl注入液相色谱仪，测定，以浓度(X)为横坐标，以峰面积(Y)为纵坐标，进行线性回归，回归方程为Y=628112.0X-7641.88(r=0.9999)。结果表明，阿魏酸在0.0134～0.2708μg范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.3.3 精密度试验 精密吸取对照液10 μl，重复进样6次，记录色谱图，按峰面积计算，结果RSD=0.2%，表明仪器精密度良好。
2.3.4 重复性试验 取同一批号样品6份，分别依法处理，测定结果RSD=0.%，表明该方法重复性良好。
2.3. 稳定性试验 取同一供试品溶液，室温放置，按上述色谱条件，分别于0、2、4、8、12、24 h进样，测得峰面积值RSD=0.8%。结果表明，供试品溶液在24 h内基
, http://www.100md.com 2.3.6 加样回收率试验 精密称取己知含量的样品(批号：201411111，阿魏酸含量为0.0079 mg/g)6份，每份1.8g，精密加入阿魏酸对照品溶液(0.0120mg/ml)1ml，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率(表1)。
2.4 样品含量的测定 取3批样品，按供试品溶液方法制备，分别进样10μl，依法测定，采用外标法计算样品中阿魏酸的含量(表2)。
3 讨论
本实验中，阿魏酸在316nm处有最大吸收，因此选用316nm作为检测波长。
在实验过程中，按照参考文献，用乙腈-0.08%磷酸，阿魏酸色谱峰基本达到了基线分离，其他组分无干扰，且稳定性良好。经过反复实验，最终建立了适合本品的流动相比例为乙腈-0.08%磷酸(17∶83)。
, 百拇医药 综合考虑提取分离中药有效成分常用方法的优缺点，本方法以70%甲醇为溶剂，由于溶剂浸提法费时，效率一般，故采用加热回流提取法作为参芪健胃颗粒中阿魏酸的提取方法。
参芪健胃颗粒具有温中健脾、理气和胃之功效，用途广泛，但原有标准过于简单。本文阐述的含量测定方法专属性强、重现性好、阴性对照无干扰、方法可靠，使参芪健胃颗粒原有的质量标准得到充实、完善，更能准确、有效控制参芪健胃颗粒的质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：124-12.
[2]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药方成制剂第十册[S].北京：人民卫生出版社，199：103.
[3]邱颖.RP-PLC法测定丹灯通脑软胶囊中葛根素和阿魏酸的含量[J].安徽医药，2013，17(2)：212-213.
[4]黄罗，郭健新，刘咏梅，等.PLC测定阿魏酸的含量探讨[J].中成药，2004，26(2)：134-136.
夏明，董晓烨.当归养荣丸中阿魏酸的含量测定[J].医药导报，2010，29(1)：103-104., http://www.100md.com(勾晓丹姜丽华张莹莹赵明杰)
【关键词】 PLC；参芪健胃颗粒；阿魏酸
【中图分类号】 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-817(201)1-0017-02
参芪健胃颗粒收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十册，由党参、当归、黄芪等十四味药材加工制成。具有温中健脾、理气和胃之功效。主治脾胃虚寒型的慢性萎缩性胃炎、适用于胃脘胀痛、痞闷不适、喜气喜按、嗳气呃逆等症。原标准中只有性状、鉴别和检查项，无其他检定方法。为控制参芪健胃颗粒的质量，本文参考有关文献，采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography，PLC)法对处方中当归的有效成分阿魏酸的含量进行了测定，经方法学验证，结果较为满意，为参芪健胃颗粒定量指标提供了依据。
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1 材料与方法
1.1 实验仪器 岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(包括LC-2010型紫外检测器；LC Solution色谱工作站)；CPA22D型电子天平(十万分之一)；BSA224-CW型电子天平(万分之一)。
1.2 试剂与试药 乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为超纯水；阿魏酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110773-201313)；参芪健胃颗粒(河南辅仁堂制药有限公司，批号：201311421、201403232 、201411111)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱CAPCELL PAK C18(4.6 mm×20 mm， μm)；流动相：乙腈-0.08%磷酸(17∶83)；柱温：3℃，体积流量：1.0 ml/min；检测波长316 nm；对照液和供试品液进样量均为10 μl。理论板数：按阿魏酸计算理论板数不低于000；分离度大于1.，外标法计算含量。
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2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取对照品12mg，置100ml量瓶，加入70%甲醇适量使溶解，标定至刻度，摇匀。精取ml置0ml量瓶，70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2.2 供试品溶液 取装量差异下供试品适量，研细，精密称定1.8g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，密塞，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液经0.4μm滤膜滤过，即得。
2.2.3 阴性对照液 按照处方制法制备缺少当归的模拟样品，同供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 阴性干扰实验 取“2.2项下3种溶液各10 μl，分别注入高效液相色谱仪测定。结果阴性对照液色谱图中在阿魏酸峰对应的保留时间附近未检出干扰峰(图1)。
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2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1、、10、1、20μl注入液相色谱仪，测定，以浓度(X)为横坐标，以峰面积(Y)为纵坐标，进行线性回归，回归方程为Y=628112.0X-7641.88(r=0.9999)。结果表明，阿魏酸在0.0134～0.2708μg范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.3.3 精密度试验 精密吸取对照液10 μl，重复进样6次，记录色谱图，按峰面积计算，结果RSD=0.2%，表明仪器精密度良好。
2.3.4 重复性试验 取同一批号样品6份，分别依法处理，测定结果RSD=0.%，表明该方法重复性良好。
2.3. 稳定性试验 取同一供试品溶液，室温放置，按上述色谱条件，分别于0、2、4、8、12、24 h进样，测得峰面积值RSD=0.8%。结果表明，供试品溶液在24 h内基
, http://www.100md.com 2.3.6 加样回收率试验 精密称取己知含量的样品(批号：201411111，阿魏酸含量为0.0079 mg/g)6份，每份1.8g，精密加入阿魏酸对照品溶液(0.0120mg/ml)1ml，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率(表1)。
2.4 样品含量的测定 取3批样品，按供试品溶液方法制备，分别进样10μl，依法测定，采用外标法计算样品中阿魏酸的含量(表2)。
3 讨论
本实验中，阿魏酸在316nm处有最大吸收，因此选用316nm作为检测波长。
在实验过程中，按照参考文献，用乙腈-0.08%磷酸，阿魏酸色谱峰基本达到了基线分离，其他组分无干扰，且稳定性良好。经过反复实验，最终建立了适合本品的流动相比例为乙腈-0.08%磷酸(17∶83)。
, 百拇医药 综合考虑提取分离中药有效成分常用方法的优缺点，本方法以70%甲醇为溶剂，由于溶剂浸提法费时，效率一般，故采用加热回流提取法作为参芪健胃颗粒中阿魏酸的提取方法。
参芪健胃颗粒具有温中健脾、理气和胃之功效，用途广泛，但原有标准过于简单。本文阐述的含量测定方法专属性强、重现性好、阴性对照无干扰、方法可靠，使参芪健胃颗粒原有的质量标准得到充实、完善，更能准确、有效控制参芪健胃颗粒的质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：124-12.
[2]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药方成制剂第十册[S].北京：人民卫生出版社，199：103.
[3]邱颖.RP-PLC法测定丹灯通脑软胶囊中葛根素和阿魏酸的含量[J].安徽医药，2013，17(2)：212-213.
[4]黄罗，郭健新，刘咏梅，等.PLC测定阿魏酸的含量探讨[J].中成药，2004，26(2)：134-136.
夏明，董晓烨.当归养荣丸中阿魏酸的含量测定[J].医药导报，2010，29(1)：103-104., http://www.100md.com(勾晓丹姜丽华张莹莹赵明杰)