脂溶性蟾毒配基的纯化工艺研究(2)
2 方法与结果2.1 蟾毒配基的薄层色谱法鉴别 取蟾毒灵、华蟾酥毒基与脂蟾毒配基对照品,加甲醇分别制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液;再取蟾酥分离物细粉12mg,加甲醇稀释并定容至10mL量瓶中,摇匀,作为供试品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015版一部附录VIB)试验,吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-三氯甲烷-丙酮(4∶ 3∶ 3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
2.2 蟾毒配基的含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱:HiQ sil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);预柱:Fusion-RP 4 mm×3.0 mm;流动相:乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液(45∶55; pH: 3.2);流速:1mL/min;检测波长:296nm;柱温:40℃;进样量:10μL;理论塔板数以蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基峰计算均不低于4000 ......
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