2.2 流式细胞仪检测细胞凋亡率 将5637细胞以2×106/孔接种于6孔板中，待细胞贴壁后分别加入不同浓度的芹菜素(50、75、100μmol/L)，处理24h后收集细胞，并调整细胞数至1×106/mL，用预冷PBS 洗涤细胞2次，弃上清液。加入100μL染料结合缓冲液重悬后，加入10μL AnnexinV-FITC 染色，混匀后室温避光静置15min，然后加入200μL的染料结合缓冲液和5μL PI染液(50mg/L)，静置5min，立即进行流式细胞仪分析。

    2.3 Western blotting检测Bax、Bcl-2和PARP蛋白表达 将5637细胞以2×105/孔接种于6孔板中，以75、100μmol/L芹菜素作用细胞24h后，收集细胞，在每管细胞中加入100μL的蛋白裂解液后，BCA法进行总蛋白定量，每泳道上样量为40μg总蛋白，经10% SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜上。一抗稀释浓度分别为：Bax(1∶3000)、Bcl- 2(1∶2000)、PARP(1∶2000)、GAPDH(1∶10000)。羊抗兔/鼠二抗为1∶5000稀释。ECL化学发光液，X光片暗室曝光、显影及定影 ......