仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响(2)
13实验细胞小鼠单核巨噬细胞细胞(RAW 2647细胞)购自中国科学院典型培养物保藏委员会昆明细胞库,编号为:KCB200603YJ。14[JP3]实验药物仙茅多糖由贵州省中国科学院天然化学产物重点实验室提供,多糖含量≥50%。多糖溶于DMEM中配制成浓度为50000μg/mL的母液,滤菌后4℃保存,实验时用DMEM培养液稀释即得。[JP]
2方法
21细胞分组及处理参考文献方法[16],选取对数生长期的RAW2647细胞并调浓度为106个/mL。接种至无菌96孔板中(100μL/well),总共21孔,随机分为COP高、中、低剂量实验组、阳性对照组和空白对照组,每个样本浓度设3个复孔。[JP3]待细胞贴壁后,吸弃上清,分别加入含COP(终浓度为12500、6250、3125μg/mL)的DMEM[JP]完全培养基;阳性对照组加入含香菇多糖的培养基(终浓度为6250μg/mL);空白对照组加入等量的培养基,完成后置于37℃、5%的CO2细胞培养箱中孵育。
22指标检测细胞孵育36h后 ......
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