1仪器与材料

    11材料CCK-8试剂(日本同仁化学)，Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(上海贝博生物有限公司)，兔RPE细胞(赛齐(上海)生物工程有限公司)。

    12仪器E680酶联免疫检测仪(BIO-RAD公司)；流式细胞仪(美国BD公司)；电热恒温水浴锅(绍兴木可桥医疗器械厂)。

    2方法

    21兔RPE细胞的培养兔RPE细胞培养条件为：10% DMEM完全培养基(含100U/mL青霉素，100mg/L链霉素)，于37℃、5%CO2培养箱中培养。

    22细胞处理取若干瓶对数生长期的兔RPE细胞，弃旧培养液，温PBS洗涤2遍，025%胰蛋白酶消化约3min，镜下观察细胞回缩变圆、变亮，立即终止消化，用吸管吸取部分培养液，轻轻将细胞从瓶壁吹打下来，分别移入若干离心管中。

    23实验分组①对照组，细胞不做任何处理；②55℃水浴3min组；③55℃水浴5min组；④55℃水浴8min组。

    24CCK-8法测定细胞活性将加温处理的各管细胞接种于96孔板中，每孔100μL，再避光加入CCK-8试剂，继续孵育4h后，在酶标仪上测量其OD值。酶标仪的内置检测波长为450nm ......