21菌液制备接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基，30～35℃培养18～24h。接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基，20～25℃培养2～3d。取接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基，20～25℃培养5～7d。取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、白色念珠菌的新鲜培养物用09%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。取黑曲霉的新鲜培养物，加入3～5mL含005%聚山梨酯80的09%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，之后用含005%聚山梨酯80的09%无菌氯化钠溶液将孢子悬液稀释成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。

    22供试品的制备将购买的大黄饮片置于用酒精棉球擦拭过的万用粉碎机中，粉碎，用灭菌的药匙将大黄粉末移动至灭菌广口瓶中待用。

    23供试液的制备取大黄粉末10g，加pH 70氯化钠-蛋白胨缓冲液100mL，制成1∶10供试液。依次稀释为1∶50、1∶100稀释液。

    24计数方法适用性试验

    241需氧菌总数计数方法适用性试验试验组取1∶10、1∶50、1∶100供试液99ML于灭菌试管中，加入制备好的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉菌液01mL ......