2 方法

    2.1 溶液配制 磷酸盐缓冲液的配制：精密称取磷酸二氢钾0.9560 g，三水合磷酸氢二钾6.9460 g以及乙二胺四乙酸(EDTA)18.62 mg于500mL的烧杯中，倒入适量超纯水超声片刻，取出，置于500 mL的容量瓶中并定容，即得浓度为75 mmol/L PO43-、200 μmol/L EDTA且pH 为7.4的磷酸盐缓冲液；分装并保存于-20℃的冰箱中。

    黄嘌呤氧化酶液的配制：原黄嘌呤氧化酶(10U/mL)保存在-70℃的冰箱中以备用，实验时在超净台用磷酸盐缓冲液稀释酶至0.08U/mL，置于冰盒中并尽快实验，并避免酶反复冻融而降低活性。

    底物的配制：精密称取底物黄嘌呤3.65 mg放置于烧杯中，加入磷酸盐缓冲液适量超声促溶，取出，定容至50 mL，摇匀；置于水浴锅里逐渐加热至澄清透明，得0.48 mmol/L底物溶液。底物溶液应现用现配制。

    2.2 样品的配制 精密称取各样品适量，用DMSO分别配制成10 mmol/L 储备液，保存在-20℃的冰箱中并用锡箔纸包好避光。实验时用磷酸盐缓冲液对半稀释至6～8个浓度并涡旋混匀。

    2.3 测定方法与数据处理 底物黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶的催化下生成产物尿酸 ......