重楼醇提物对三种神经胶质瘤细胞株的细胞毒性研究(2)
1.5 细胞毒性检测 将人神经胶质瘤U251、U87、T98G細胞株分别置于含10%新生牛血清,100U/mL青霉素,100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基中,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养,待细胞达到80%~90%融合时,0.25%胰蛋白酶消化传代,选用第3代神经胶质瘤细胞做细胞毒性实验研究,调整细胞浓度为 2×105/mL,将细胞重悬后接种于96孔板中,每孔100μL,培养24h后在每个实验孔中分别加入50SμL测试样品溶液,每个浓度样品设3个复孔,同时设置空白对照组(DMSO) 和阳性对照组(DDP),继续培养 48h后,于每个实验孔中加入10μL 预先用生理盐水配制好的MTT 检测液,培养箱中继续孵育 6h,沿培养孔边缘轻柔将上清液吸去,实验孔中分别加入DMSO 100μL,培养板放置于微量振荡器上,振荡 5min直至甲臜完全溶解,使用酶标仪 在570nm 处测定吸光度OD值,使用下面的公式计算样品对肿瘤细胞的生长抑制率,抑制率(%)= (OD空白-OD样品) / OD空白×100%,通过SPSS 13.0统计软件计算获得IC50值。2 结果
用聚酰胺层析分离划段所得的重楼醇提物13个部位样本中 ......
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