HPLC法测定安康颗粒中阿魏酸的含量
【摘 要】目的：采用HPLC法测定安康颗粒中阿魏酸的含量。方法：色谱柱Waters XSelect HSS T3(4.6×250 mm，5 μm);流动相：甲醇-0.085%磷酸溶液(25∶75)为流动相，等度洗脱;流速：1.0 mL/min;检测波长：316 nm;柱温：30 ℃。 结果：阿魏酸对照品在0.224-2.247 μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好，r=0.9994;平均回收率为100.31%(RSD=1.58%)。 结论：所采用的方法准确、可靠，可行性及重复性良好，能有效控制安康颗粒的质量。
【关键词】安康颗粒;阿魏酸;高效液相色谱法
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517(2019)19-0042-02
Abstract：Objictive To establish a HPLC method for the simultaneous content determination of ferulic acid in Ankang Granules.Methods The analysis of methanol-0.085% phosphoric acid(25∶75) extract of Ankang Granules was performed on a 30℃ thermostatic InertsiL Waters XSelect HSS T3(4.6×250 mm，5 μm)，with the mobile phase comprising of methanol-water flowing at 1.0 mL/min. Results Ankang Granules showed good linear relationships within their own ranges( r=0.9994)，whose average recoveries were 100.31%，with the RSDs of 1.58%. Conclusion This sensitive，teliable and accurate mehtod can be used for the quality control of Ankang Granules.
Key words：Ankang Granules;Ferulic Acid;HPLC
安康颗粒是由红参、银耳、当归、山药、猪脊髓、鹿茸、山楂等七位药材煎煮制成的颗粒剂，具有安和五脏、健脑安神的功效，主要用于治疗头目眩晕、耳鸣、四脚乏力疲软、食欲不振、睡眠不深、多梦等症。现执行标准为《国家食品药品监督管理局国家药品标准WS3-B-2888-98-1》[1]，检验项目仅有性别和理化鉴别两项，均较简单，不能有效控制该样品质量。在安康颗粒处方组成中，当归用量较大，为主要组成部分，当归的主要有效成分为阿魏酸。本实验建立HPLC法测定安康颗粒中阿魏酸的含量，为该制剂质量控制提供参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器 LC-20AT液相色谱仪(含SPD-20A检测器，岛津);MS205DU电子天平(梅特勒托利多)，水浴鍋 。
1.2 材料 阿魏酸对照品(批号110773-201614，中国食品药品检定研究院)。理气舒心片(批号：20180803、20190309、)。甲醇(色谱纯，Fisher公司)，磷酸，水为注射用水;
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 取对照品阿魏酸适量，精密称定，加甲醇制成浓度为11.236 μg/mL的对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液制的制备 取研细安康颗粒约10 g，精密称定，精密加甲醇10mL，称定重量，加热回流30min，冷却后用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，即得供试品溶液。
2.2 色谱条件 色谱柱在：Waters XSelect HSS T3(4.6×250 mm，5 μm);流动相：甲醇-0.085%磷酸溶液(25∶75);流速：1.0 mL/min;检测波长：316 nm;柱温：30 ℃。色谱图见图1、图2。
2.3 线性关系考察 精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液适量，加甲醇溶液稀释制备成浓度分别为0.224、0.449、0.899、1.124、2.247 μg/mL系列混合对照品溶液，按照“2.2”项下的条件进行测定。以对照品的质量浓度为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归，Y=83328X-1355.2，r=0.9994，表明阿魏酸在该0.224～2.247浓度范围内线性关系良好。
2.4 精密度试验 精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液，在“2.2”项色谱条件下，连续进样6次，测得其RSD分别为0.13%，表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验 精密称取研细的安康颗粒粉末，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液。于制备后0、2、4、8、16在“2.2”项色谱条件下进样，测得其RSD为1.08%，表明供试品溶液在16 h内稳定性良好。
2.6 重复性试验 精密称取研细的安康颗粒粉末，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液6份，在“2.2”项色谱条件下进样，测得其RSD为2.85%，表明该方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验 取6份已知含量的研细的安康颗粒粉末约10 g，精密称定，精密加入“2.1.1”项下对照品适量后，按按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下进样，以外标法计算各阿魏酸的量，计算其加样回收率，结果见表1。
2.8 样品含量测定 取安康颗粒供试品，按“2.1.2”项下方法平行制备供试品溶液各2份，在“2.2”项下色谱条件下进样，以外标法计算阿魏酸的含量，结果见表2。
3 分析与讨论
3.1 指标成分选择 在该药品处方组成中，仅有红参、当归在《中国药典》2015年版[2]中收载有含量测定项。经过试验发现，红参因处方量较小，且经过煎煮后，转移到制剂中的人参皂苷量较低，导致无法检出。故本实验选择当归中的阿魏酸进行含量测定，以评估安康颗粒的质量。
3.2 测定方法选择 样品前处理方面，本实验考察了甲醇提取、70%甲醇提取、乙醇提取、70%乙醇提取，发现甲醇提取出的阿魏酸量最高，故最终选取了甲醇作为提取溶剂。
综上所述，本实验所建立的高效液相色谱方法操作简单，重复性好，可在较短时间内实现安康颗粒中阿魏酸的含量测定。因此，该方法可用于安康颗粒的质量控制与评价。
参考文献
[1]国药典委员会.卫生部药品标准.中药成方制剂(第八册)[S].1993：87.
[2]国药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015.
(收稿日期：2019-07-23 编辑：刘斌), 百拇医药(袁文洪 高宇明 谢艳 何琴 吴秀清)
【关键词】安康颗粒;阿魏酸;高效液相色谱法
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517(2019)19-0042-02
Abstract：Objictive To establish a HPLC method for the simultaneous content determination of ferulic acid in Ankang Granules.Methods The analysis of methanol-0.085% phosphoric acid(25∶75) extract of Ankang Granules was performed on a 30℃ thermostatic InertsiL Waters XSelect HSS T3(4.6×250 mm，5 μm)，with the mobile phase comprising of methanol-water flowing at 1.0 mL/min. Results Ankang Granules showed good linear relationships within their own ranges( r=0.9994)，whose average recoveries were 100.31%，with the RSDs of 1.58%. Conclusion This sensitive，teliable and accurate mehtod can be used for the quality control of Ankang Granules.
Key words：Ankang Granules;Ferulic Acid;HPLC
安康颗粒是由红参、银耳、当归、山药、猪脊髓、鹿茸、山楂等七位药材煎煮制成的颗粒剂，具有安和五脏、健脑安神的功效，主要用于治疗头目眩晕、耳鸣、四脚乏力疲软、食欲不振、睡眠不深、多梦等症。现执行标准为《国家食品药品监督管理局国家药品标准WS3-B-2888-98-1》[1]，检验项目仅有性别和理化鉴别两项，均较简单，不能有效控制该样品质量。在安康颗粒处方组成中，当归用量较大，为主要组成部分，当归的主要有效成分为阿魏酸。本实验建立HPLC法测定安康颗粒中阿魏酸的含量，为该制剂质量控制提供参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器 LC-20AT液相色谱仪(含SPD-20A检测器，岛津);MS205DU电子天平(梅特勒托利多)，水浴鍋 。
1.2 材料 阿魏酸对照品(批号110773-201614，中国食品药品检定研究院)。理气舒心片(批号：20180803、20190309、)。甲醇(色谱纯，Fisher公司)，磷酸，水为注射用水;
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 取对照品阿魏酸适量，精密称定，加甲醇制成浓度为11.236 μg/mL的对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液制的制备 取研细安康颗粒约10 g，精密称定，精密加甲醇10mL，称定重量，加热回流30min，冷却后用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，即得供试品溶液。
2.2 色谱条件 色谱柱在：Waters XSelect HSS T3(4.6×250 mm，5 μm);流动相：甲醇-0.085%磷酸溶液(25∶75);流速：1.0 mL/min;检测波长：316 nm;柱温：30 ℃。色谱图见图1、图2。
2.3 线性关系考察 精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液适量，加甲醇溶液稀释制备成浓度分别为0.224、0.449、0.899、1.124、2.247 μg/mL系列混合对照品溶液，按照“2.2”项下的条件进行测定。以对照品的质量浓度为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归，Y=83328X-1355.2，r=0.9994，表明阿魏酸在该0.224～2.247浓度范围内线性关系良好。
2.4 精密度试验 精密吸取“2.1.1”项下对照品溶液，在“2.2”项色谱条件下，连续进样6次，测得其RSD分别为0.13%，表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验 精密称取研细的安康颗粒粉末，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液。于制备后0、2、4、8、16在“2.2”项色谱条件下进样，测得其RSD为1.08%，表明供试品溶液在16 h内稳定性良好。
2.6 重复性试验 精密称取研细的安康颗粒粉末，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液6份，在“2.2”项色谱条件下进样，测得其RSD为2.85%，表明该方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验 取6份已知含量的研细的安康颗粒粉末约10 g，精密称定，精密加入“2.1.1”项下对照品适量后，按按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下进样，以外标法计算各阿魏酸的量，计算其加样回收率，结果见表1。
2.8 样品含量测定 取安康颗粒供试品，按“2.1.2”项下方法平行制备供试品溶液各2份，在“2.2”项下色谱条件下进样，以外标法计算阿魏酸的含量，结果见表2。
3 分析与讨论
3.1 指标成分选择 在该药品处方组成中，仅有红参、当归在《中国药典》2015年版[2]中收载有含量测定项。经过试验发现，红参因处方量较小，且经过煎煮后，转移到制剂中的人参皂苷量较低，导致无法检出。故本实验选择当归中的阿魏酸进行含量测定，以评估安康颗粒的质量。
3.2 测定方法选择 样品前处理方面，本实验考察了甲醇提取、70%甲醇提取、乙醇提取、70%乙醇提取，发现甲醇提取出的阿魏酸量最高，故最终选取了甲醇作为提取溶剂。
综上所述，本实验所建立的高效液相色谱方法操作简单，重复性好，可在较短时间内实现安康颗粒中阿魏酸的含量测定。因此，该方法可用于安康颗粒的质量控制与评价。
参考文献
[1]国药典委员会.卫生部药品标准.中药成方制剂(第八册)[S].1993：87.
[2]国药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015.
(收稿日期：2019-07-23 编辑：刘斌), 百拇医药(袁文洪 高宇明 谢艳 何琴 吴秀清)