刘学军,檀碧波,吴胜春,韩 杰

    化疗是胃癌综合治疗的重要措施,而肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的存在常导致化疗失败。因此,预测胃癌细胞的化疗敏感性具有重要意义。有研究表明,化疗敏感性与肿瘤细胞的增殖和凋亡有关[1-5],而目前关于胃癌细胞增殖、凋亡相关因子表达与化疗药物敏感性关系的临床研究少有报道。因此,本研究探讨了凋亡抑制蛋白 Survivin和反映增殖水平的 Ki-67与胃癌细胞体外化疗敏感性的关系及意义。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 标本取自2006年 10月—2007年12月在我院手术并经病理证实的 64例胃癌患者的新鲜肿瘤组织。64例胃癌患者中男 35例,女 29例,年龄 45～77岁,平均 (65.7±9.0)岁。术前均未接受任何治疗。术中分别取新鲜肿瘤组织1.0 cm×0.5 cm×0.5 cm置入双抗 (青霉素 G钠 100 U/ml、链霉素 200μg/ml)培养液行MTT法体外肿瘤细胞化疗药物敏感性实验。另每例肿瘤标本经中性甲醛溶液固定,常规石蜡包埋、切片行免疫组化染色。

    1.2 方法

    1.2.1 免疫组化染色测定 Survivin、Ki-67蛋白表达 鼠抗人 Survivin、Ki-67单克隆抗体及免疫组化试剂盒均购自北京中杉生物技术公司 (美国 Zymed公司产品),采用 SP法分别对肿瘤组织进行免疫组化染色,观察 Survivin、Ki-67蛋白表达情况,染色步骤严格按试剂盒说明书进行操作。用 PBS代替一抗做阴性对照,用已知阳性切片做阳性对照。由两位病理医师分别双盲阅片进行结果判断。每张切片随机取 5个高倍(×400)视野,每视野计数 100个细胞,Survivin以细胞膜及(或)细胞质、Ki-67以细胞核呈黄色着色为染色阳性,按肿瘤细胞着色强度和阳性细胞率分别进行记分 ......