薛 茜,邹玉安,赵宝民,杨向方

    脑缺血再灌注损伤导致的迟发性神经元损伤,主要与氧化应激反应、炎症反应及细胞凋亡等有关。康脑液 1号为临床治疗缺血性脑血管病的经验组方,临床疗效良好。药理研究证实康脑液 1号组方中单药如黄芪、三七、葛根等具有扩张血管、改善脑血流及微循环、降低血液黏度及血脂、抑制炎性反应等作用[1-4]。神经元凋亡是一种受基因调控的自主性、程序性细胞死亡过程,是脑缺血再灌注损伤的重要环节。Bcl-2/Bax比值与细胞凋亡调控有关。本研究通过观察康脑液 1号对局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗带神经元凋亡和 Bcl-2/Bax比值的影响,探讨其可能的脑保护作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠180只,体质量 (270±20)g,SPF/UAF级,购自北京大学医学部实验动物科学部,许可证号:SCXK(京)2006-0008。称重后随机将大鼠分成 5组,每组 36只。 (1)假手术组;(2)模型组 (缺血再灌注组);(3)盐酸法舒地尔注射液组;(4)康脑液 1号 A组;(5)康脑液 1号 B组。

    1.2 药物与试剂 康脑液 1号,由黄芪、三七等 8味中药组成,由河北北方学院第一附属医院中药房煎制。常规煎煮并浓缩至 4 g/ml。盐酸法舒地尔注射液 (川威):天津红日药业股份有限公司生产 (国药准字 H20040356;产品批号:060608;规格 2 ml:30 mg)。栓线购自北京沙东生物技术有限公司〔产品编号2432-100,线长40 mm,线身直径 0.24 mm,头端直径 (0.32±0.02)mm〕。凋亡试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司 (产品批号:10090522)。

    1.3 方法

    1.3.1 动物模型制备 康脑液 1号采用灌胃法,盐酸法舒地尔注射液采用腹腔注射,均连续给药 7 d,每天早晨给药 1次,最后 1次给药 1 h后实施脑缺血再灌注手术,术后继续给药至再灌注各时间点 (12、24、72 h);给药剂量按大鼠与人体表面积等效剂量折算,康脑液 1号 A组剂量为 1.5 g·100 g-1·d-1,B组剂量为 3.0 g·100 g-1·d-1。假手术组和模型组大鼠自手术日前 7天开始给予等量去离子水灌胃。采用改良 Longa法[5]复制大鼠大脑中动脉栓塞模型 (MCAO),大鼠用 7%水合氯醛 (350 mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定于大鼠解剖板上;剪去颈右前部手术区的毛,碘酒消毒,铺洞巾,于颈部行 15 mm旁正中纵行切口,并钝性分离右侧颈总动脉、颈内动脉及颈外动脉;用无损伤动脉夹夹闭颈总动脉近心端后,颈外动脉远端结扎,靠近颈内、外分叉处约 5 mm剪一小切口,迅速将栓线插入颈内动脉直至有轻微阻力感为止,模型组、盐酸法舒地尔组及康脑液1号 A、B组栓线插入深度为 (20.0±0.5)mm;假手术组麻醉同上,颈部切口暴露颈外动脉,不插线 ......