曲华伟,张阳德,陈玉祥,赵劲风,王吉伟,何剪太

    原发性肝癌是世界上最常见且恶性程度最高的肿瘤之一, 发病率在恶性肿瘤中位居世界第 5位,病死率位居第 3位[1]。传统的手术治疗、放疗、化疗等都不能对其彻底治愈。因此,研究探索新疗法具有重要意义。近年来,随着近红外激光技术的研究进展,在近红外激光水平上开展肿瘤热疗引起了人们的广泛兴趣。本研究通过观察近红外激光 (808 nm)诱导产热对肝癌进行体内、体外的实验研究,旨在为开辟新的有效的肝癌治疗途径提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞株及实验动物 人肝癌 HepG2细胞,由中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心传代培养。BALB/N裸鼠 56只,4～6周龄,22～25 g,雄性,饲养于中南大学动物学部层流动物房。

    1.2 方法 体外实验:(1)人肝癌 HepG2细胞贴壁生长48 h,热疗组分别按激光功率 1、2、3、4 W各照射 10 min,对照组 Hep G2细胞未照射,继续培养 24 h,然后用苔盼蓝染色后于倒置显微镜下拍照;(2)细胞接种于 96孔培养板中,培养 48 h后分别按不同功率近红外激光 (1、2、3、4 W)照射 10 min,继续培养,进行 MTT实验;(3)肿瘤细胞传代后制成单细胞悬液,接种于 24孔培养板中,并设对照组,近红外激光按不同功率 (1、2、3、4 W)分别照射 10 min,24 h后收集细胞,接种于 96孔培养板中,每 24 h计算细胞数量,连续 4次。

    体内实验:将 30只移植性人肝癌裸鼠按随机数字表法分为对照组和热疗组,热疗组又分为 1 W照射组、2 W照射组、3 W照射组和 4 W照射组,每组6只。各热疗组裸鼠分别给予不同功率近红外激光照射10 min,每3 d照射 1次,观察肿瘤的生长情况。8周后治疗结束,处死裸鼠,剥离瘤体,观察肿瘤体积变化。用苏木素 -伊红染色观察对照组与各热疗组裸鼠移植瘤组织的病理变化 ......