陈乃耀,王大力,张 江,汪 静

    研究已证实化疗药物可以使白血病细胞的恶性增殖受到抑制,加速细胞的凋亡,而且在分子水平上可以出现凋亡相关基因的改变[1-2]。现以 K562细胞为研究对象,检测格列卫

    (STI571)单药及 STI571与三氧化二砷 (As2O3)联合应用对白血病细胞某些生物学特性及与 BCR/ABL融合基因下游信号通路有关的凋亡相关因子 Caspase-3和 Bcl-xL mRNA表达的影响,以探明两药抗白血病细胞作用的可能的分子机制,为临床治疗白血病提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器 K562细胞 (中国医学科学院血液病研究所),RPMI1640培养基 (美国 GIBICO公司),Trizol(美国invitrogen公司),AMV反转录试剂盒 (上海生工生物技术有限公司),AnnexinV/PI检测试剂盒 (晶美生物工程公司),STI571(诺华公司),As2O3(哈尔滨伊达药业有限公司),焦碳酸二乙酯 (DEPC)原液 (中国医学科学院血液研究所),超净工作台 (青岛海尔医用低温科技有限公司),Line-gene荧光定量、PCR检测系统 (杭州博日科技有限公司)等。

    1.2 方法步骤 (1)配制 RPMI1640培养基、100×双抗、DEPC原液、四甲基噻唑蓝 (MTT)溶液等。 (2)K562细胞的复苏、冻存。(3)分组:对照组为未用药物处理的 K562悬浮培养组;实验 1组 (EG1组)为单用 1μmol/L STI571处理组,实验 2组 (EG2组)为 1μmol/L STI571与 2μmol/L As2O3处理组 ......