胡 杨，吴 清，刘朝霞，傅 念，阳学风

    生理情况下，胃黏膜的完整性依赖于机体的损伤因素和防御机制之间的平衡。目前,虽然对引起胃黏膜损伤的因素有了较深的认识，但对参与胃黏膜防御的细胞和分子机制仍不明了。血红素氧合酶1(HO-1)是催化血红素降解为一氧化碳(CO)、亚铁离子和胆红素的限速酶，并在机体的抗炎症、抗氧化损伤中发挥重要作用[1]。研究显示，HO-1在胃上皮细胞质中成组性表达，而幽门螺杆菌感染后，HO-1表达水平显著增高[2]，此外，维生素C对胃黏膜的保护作用可能与诱导HO-1表达有关，且HO-1的诱导表达可促进大鼠溃疡模型的愈合[3]。因此，以HO-1为出发点，寻求相应的诱导剂，对治疗胃黏膜损伤具有重要意义。埃索美拉唑是一种新型的质子泵抑制剂(PPI)，通过抑制胃壁细胞的H+/K+-ATP酶来降低胃酸分泌，防止胃酸的形成，临床上用于治疗由高分泌胃酸引起的胃肠道黏膜疾病，如胃溃疡和反流性食管炎等疾病[4-5]。然而,近期也有研究显示多种酸泵拮抗剂对胃黏膜本身具有多效作用，包括抗凋亡作用、抑制活性氧(ROS)的形成和抑制巨噬细胞黏附素分子的表达。这类药物不仅用于治疗各种胃黏膜疾病，同时对Crohn病也有一定疗效。由于ROS在胃黏膜损伤中的作用日益受到重视，因此PPI对ROS的清除可能是其抗酸之外的胃黏膜保护效应的重要机制[6-7]。本研究旨在探讨埃索美拉唑对胃上皮细胞表达HO-1的影响。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂 埃索美拉唑购自Astrazeneca公司，SYBGREEN PCR Mix购自ABI公司，TRIZol购自Invitrogen公司，cDNA反转录试剂盒购自Fermentas公司，HO-1活性试剂盒购自上海GENMED公司，RIPA裂解液、ECL试剂盒购自Pierce公司，BCA试剂盒购自江苏碧云天生物技术公司，HO-1和β-actin多克隆抗体购自Santa Cruz公司，RPMI 1640培养基和胎牛血清购自 Gibco公司，放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)购自Sigma-Adrich公司。

    1.2 细胞培养与处理 人胃上皮AGS细胞购自中科院上海细胞库，细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基，在37 ℃ 5%二氧化碳(CO2)环境中培养。待细胞长至培养基颜色变黄，此时细胞基本满瓶，收集细胞，1 000 r/min离心5 min(离心半径12 cm)，弃去培养基，无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后，用无血清RPMI 1640培养液于6孔板中调整其密度为1×105/ml ......