推拿手法对家兔实验性类风湿性关节炎血液流变学和微循环的影响(1)
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摘要：目的：探讨推拿手法对类风湿性关节炎的疗效和作用机理，并提供临床理论依据。方法：将40只健康2月龄日本大耳白兔随机分为四组，即“正常组10只，模型组10只，药物对照组10只，推拿手法组10只”。除正常组外其它三组均造成卵蛋白性关节炎模型。药物对照组给予旭痹冲剂，推拿手法组以“通”法为主，“补”法为辅，均连续治疗10天。用解剖显微镜和血流变仪检测四组动物微循环和血液流变学指标的变化，抽取关节腔液在玻片上涂片，进行瑞氏染色并计数。结果：推拿手法可明显降低血浆粘度、红细胞比积、血沉，改善微循环“瘀”的状态，个别指标甚至优于药物组。结论：推拿手法具有“活血化瘀”的作用，通过“活血化瘀”达到“通则不痛”而治疗类风湿性关节炎的目的。其疗效机理是通过影响血液“粘、凝、滞、聚”的状态而实现。
关键词：推拿手法 类风湿性关节炎 血液流变学 微循环
【中图分类号】R244.1 【文献标识码】B 【文章编号】1008—1879(2010)02—0004—04
类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis简称RA)是以对称性多关节炎为主要临床表现的异质性、系统性、自身免疫性疾病。本病是慢性、进行性、侵蚀性疾病，本病呈全球性分布，是造成人类丧失劳动力和致残的主要原因之一。RA在国内外仍属于病因不明、难以治疗和预防的一种疾患。积极探索RA的发病机理和有效的防治方法，提高早期诊断率、治愈率和降低致残率是当前RA研究中的重要课题。RA因其致残率较高而受到各国科学家的重视。目前，中医疗法已被广泛的运用于临床实践中，本实验以中医疗法之推拿在内涵丰富、独具特色的中医理论指导下对类风湿性关节炎在血液流变学和微循环两方面进行动物实验研究。
1 材料与方法
1.1 材料。
1.1.1 动物。健康2月龄日本大耳白兔40只，雌雄各半，体重(Wt)1.9±1.0 kg，由兰州生物制品研究所提供。
1.1.2 仪器。解剖显微镜MC—63，西德Opton公司制造，由兰州大学生命科学学院中心实验室提供；普利生血流变仪LBY—N6A，北京普利生仪器中心制造，由甘肃中医学院中心实验室提供。
1.1.3 试剂及药品。不完全弗氏佐剂，批号：F—5506，Sigma公司生产；硫化钠，天津市化学试剂三厂生产，均由上海沪试分析仪器有限公司提供。旭痹冲剂，购自甘肃中医学院附属医院，辽宁华源本溪三药有限公司生产。
1.2 实验方法。
动物的分组、造模及处理。
1.2.1 分组。实验前适应性喂养一周后，将40只日本大耳白兔随机分为：A组(正常组)10只，B组(模型组)10只，c组(药物对照缎)10只，D组(手法治疗组)10只。
1.2.2 造模。参照文献的方法，首先将3%卵蛋白溶液与等体积不完全弗氏佐剂混合，充分震荡搅拌约一刻钟，待两者不再分层充分混匀成乳白色胶状液体即成乳化剂，然后用脱毛剂(8g硫化钠溶于100ml蒸馏水中)脱去兔背部肩胛骨间的毛，选五个注射点分别皮下注射乳化剂0.2ml进行首次致敏。28天后，用脱毛剂脱去兔右膝关节前部的毛，在关节腔内注入3%卵蛋白溶液0.2m1进行第二次致敏。
1.2.3 治疗方法。所有动物均在同一条件下(16℃—22℃，相对湿度40%—50%)，用普通饲料喂养，自由饮水，第二次致敏五天后，C组开始喂药，D组开始手法治疗。C组喂药方法：用兔盒固定兔，再用开口器撑开兔嘴，经口腔采用胶囊喂药，赶痹冲剂剂量为：每次0.56克，一日三次，连续十天。D组手法治疗以通法为主佐以补法，通法采用挤压类和摩擦类手法，补法采用摆动类和摩擦类手法。参照进行定位和操作。一日一次，一次30—40分钟，连续十天，推拿治疗操作如下：
上肢部用揉法于内外侧施治，从腕部至肩部上下往返，同时配合适当的关节活动，从肩部到腕部上下往返点按经脉和阿是穴，同时施以拿法，重点在肩、肘、腕部，并配以局部穴位。捻揉腕部及各掌指和指间关节，配以摇法，摇肩、肘关节。最后搓上肢4—5次。
下肢部用揉法施治于臀部，向下至小腿后侧，髋、膝、踝关节后面作重点治疗，同时髋后伸、外展及膝关节的伸曲被动活动。点按催情、环跳、委中。用一指掸缠法施治于大腿前部及内外侧，向下至小腿外侧，沿后三里、阳陵泉穴向下到踝部，同时配合髋关节的外展、外旋被动活动。在膝关节周围用按揉法治疗，在踝关节周围及足背用按揉法治疗配合踝关节屈伸及内、外翻活动，再捻摇足趾和摇踝关节。拿委中，沿小腿后侧到跟腱4—5次，最后搓下肢。病变较重的关节，均可加用擦法。
补法类手法要轻而柔，不宜过重刺激。参考文献的方法进行定位和操作：
①捋耳尖：用拇食指两指由远端耳尖向近端100次。
②捏脊：用拇食两指端自尾部沿脊柱两侧对称性用力捏起，从下而上做5遍。
③揉迎香：用拇指端以缓内力按压在鼻孔两侧上端，有毛与无毛交界处揉100次。
④揉大椎：用中指以缓内力按压在颈7椎与胸1椎之间凹陷中按揉100次。
⑤三里求：前、后三里穴由上向下用缓内力反复按摩左右侧各50次。
⑥抚摸梳理：先用手掌面贴紧兔背部，从头至尾抚摸20次，再经两侧面抚摸20次(四肢除外)，最后再按抚摸顺序用梳子各梳理20次，梳毛时要顺毛插梳，频率为每分钟20次，抚摸手法要舒适慢行，轻快柔和，轻等刺激量。以上手法治疗十天结束。
手法要点；每穴按摩2分钟左右，每日1次。手法要重而不滞，轻而不浮，刚柔相济，均匀深透，先轻后重。施术时，要带动皮下组织。4组动物除施加处理因素相异外，其它条件均相同。
1.3检测的指标和方法。
1.3.1球结膜微循环的检测。
1.3.1.1指标有：毛细血管管袢数，微血管流态，微动、静脉管径，管袢形态，毛细血管网交点计数，白色微小血栓，综合积分。
1.3.1.2方法：首先将解剖显微镜调整为40倍放大倍数，用标准物镜测微器进行度量矫正，方法为将刻有1mm标准长度的物镜测微器放在物镜下，然后将目镜测微器置入准备使用的目镜内，使这二个测微器的刻度重合，观察标准的1mm长度在该目镜测微器上相当多少刻度。这样就能根据目镜测微器上的刻度来测定微血管管径，毛细血管网交点计数。本实验标准的1mm长度在目镜测微器上相当于1cm长度。等解剖显微镜调整好后，然后将兔在清醒状态下人工侧卧固定，用剪毛剪剪去一侧的眼睫毛，用撑目器撑开上下眼睑，充分暴露球结膜，将冷光源光线45度斜角投射于球结膜上，进行微循环的检测。实验过程中要不断在局部滴加生理盐水，以保持球结膜湿润。所测数据参照田牛氏加权值法进行计算转换。
1.3.2关节腔液涂片的检测。
1.3.2.1指标：中性粒细胞，类风湿症细胞(即嗜碱性粒细胞)。
1.3.2.2方法：将兔用兔盒固定，用脱毛剂脱去左侧膝关节前部的毛，然后用1ml注射器抽取关节腔液，在玻片上涂片，进行, 百拇医药(魏东明 李 军 刘敬珍)