抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法学研究进展
微球,符合率,1ANCA的组成,2ANCA的检测方法发展,3总结
邢娜娜,张娜丽,王文强,孙萌,李忠信(郑州安图生物工程股份有限公司,河南郑州 450016)
抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophilcytoplasmic antibodies,ANCA)于1959年首次在慢性炎症疾病患者被发现[1],但直到1982年血管炎与中性粒细胞胞浆成分反应的自身抗体之间的关系才被明确[2],人们才意识到ANCA与血管炎相关。1985年,van der Woude等[3]通过间接免疫荧光的方法在GPA患者中检测到这种抗细胞质抗体,并把这种细胞质分布的荧光模型称为C-ANCA。继C-ANCA之后,有学者报道了在系统性动脉炎和肾小球肾炎患者中产生核通过IIF方法发现了围绕细胞核周染色模式的自身抗体,即P-ANCA[4-5]。之后IIF得到了更多的关注与应用,一度被认为是检测ANCA的“金标准”。随着PR3和MPO的发现,以及蛋白纯化技术的进步,针对抗原特异性的检测也得到快速发展,包括酶联免疫的一、二、三代产品,免疫印迹、荧光酶免疫分析、化学发光、联合特异性抗原检测的IIF,以及高通量的多重微珠免疫法等多平台、多方法学,本综述将介绍不同的检测方法及其方法学之间的一致性。
1 ANCA的组成
抗中性粒细胞胞浆抗体是以中性粒细胞及单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体,包括人白细胞弹性蛋白酶(human leukocyte elastase,HLE)、乳铁蛋白(lactoferrin,LF)、蛋白 酶3(proteinase 3,PR3)、弹性蛋白酶(elastase,ELA)、溶酶体(lysozyme,LYS)、髓过氧化物 酶(myeloperoxidase,MPO)、天青杀素(azurocidin,AZU)、组织蛋白酶G(cathepsin G,Cath G)和杀菌/通透性增高蛋(bactericidal/permeability increasing protein,BPI)等。根据荧光模型,ANCA靶抗原可以分为胞浆型(cytoplasmic ANCA,cANCA)、核周型(perinuclear ANCA,pANCA)和非典 型(atypical ANCA,xANCA) ......
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