1.3 光镜标本制作

    假手术组于术后48h处死大鼠，其他两组于缺血再灌注后规定时间点 (6h，12h，1d，3d，7d)取材。将实验用大鼠分别经10%水合氯醛深度麻醉(600mg/kg)，迅 速打开胸腔，暴露心脏，剪开右心房，于心尖部剪开左心室，插管至主动脉 ，先以150ml生 理盐水冲洗血液，随后以4℃的含4%多聚甲醛的0.1mol/L PBS液先快后慢灌注固定2h后取 脑,常规脱水、透明、石蜡包埋，连续冠状切片，切片厚度4μm，切片贴附于预处理的载玻 片，分别作常规HE染色、Bcl-2蛋白免疫组化检测。

    1.4 HE染色

    将切片经脱蜡水化后，行苏木精-伊红(HE)染色，56℃温箱内浸染20min, 光镜下观察缺血侧大脑海马的组织形态学变化。

    1.5 Bcl-2蛋白免疫组织化学检测

    兔抗大鼠Bcl-2单克隆抗体及链霉素抗生物素蛋白-过氧化 物酶(SP)免疫组化试剂盒由武汉博士德生物制剂有限公司提供。标本切片常规脱蜡、水化， 按试剂盒提供的实验步骤进行操作。DAB染色光镜下观测，胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性着 色。

    1.6 统计学处理及图像分析

    应用BX-50(olympus)光学显微镜，镜下在各区域随机观察取4个 不重叠视野摄片并高倍镜下400(倍)细胞计数,以均数±标准差(±s)表示 。利用SPSS-14.0统计分析软件进行资料统计学处理,组间比较采用F检验。

    2 结果

    2.1 HE染色结果

    假手术组海马区神经细胞排列整齐，细胞呈多角形 ......