PCR佐剂在单细胞PCR技术中的优化应用
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2013年6月1日
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匡晓燕 邓飞 遵义医药高等专科学校病理教研室;遵义医学院附属医院病理科;
【摘要】目的:探索一种优化的单细胞PCR佐剂,应用于分子病理学研究中单细胞基因的检测。方法:从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中,应用激光捕获显微切割获取单个淋巴细胞,优化单细胞PCR反应体系进行actin基因检测。对照组不添加PCR佐剂,实验A、B、C组分别添加PCR佐剂二甲基亚砜、甘油、牛血清白蛋白。结果:对照组、实验A、B、C组的单细胞扩增阳性率分别为5%,7.5%,10%,45%,对照组和实验A、B组的单细胞扩增阳性率比较无显著性差异(P0.05),而实验C组的单细胞扩增阳性率显著性高于对照组和实验A组(P0.01)。结论:牛血清白蛋白是最佳的单细胞PCR佐剂,显著提高了单细胞PCR的敏感性、特异性和稳定性。
【关键词】 单细胞 PCR佐剂 牛血清白蛋白
【基金】贵州省优秀青年科技人才基金资助(黔教高发2000371,黔科通200298)
【分类号】R346
单细胞PCR(Polymerase chain reaction,PCR)是以一个细胞所含的DNA或RNA为模板,针对靶细胞进行核酸水平的研究,该项技术与显微切割技术的结合使现代科学研究的许多领域得到突破性的进展[1]。但与普通PCR相比,单细胞PCR技术在细胞的识别与分离、模板的制备、扩增条件等各方面
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