王剑建立HPLC法测定正常儿童血清25-(OH)D₃含量并评价其应用。样品用甲醇沉淀蛋白，以10%二氯甲烷-正己烷提取；甲醇—水(88：12)为流动相，选用Diamonsil^Tm(250 min×4.6 mm，5μm)色谱柱进行分离，流速为1 ml/min，检测波长为265 mm，柱温30℃。以25-(OH)D₃标准品外标法建立标准曲线，结果发现，该方法在10～200μg/L浓度范围内线性关系好(r=0.9971)，方法回收率为93.4%～106.2%，提取回收率为88.8%～94.1%。同时也获得了较好的精度，日内变异系数(CV)为3.5%～4.4%，日间CV为3.9%～4.7%，最小检测范围为5 μg/L。刘怡欣利用HPLC法测定健康成年人血清25-(OH)D₃含量，建立方法学与上一研究类似，结果发现，25-(OH)D，在线性范围8～160μg/L内与其响应值线性关系良好(r=0.9999) ......