2.4酶联免疫吸附法(ELISA)

    酶联免疫口及附法(ELISA)是早期维生素D测定的主流方法，是将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法：ELISA法在自动化操作、节省人力、无污染等方面具有一定的优势，适合于常规临床实验室开展.但是该法只能用于检测25-(OH)D总的含量，当受试者服用维生素D₂时，ELISA法测定会存在偏差，可能造成临床决策的失误，使维生素D中毒风险增大

    另外，ELISA法的主要缺陷是对基质敏感，容易与其他非目标化合物发生交叉反应，导致方法特异性不足。而且，酶促反应受反应温度、时间、加样准确性、洗板等因素影响.批内和批间的变异系数相对较大

    高玲娟采用ELISA试剂盒检测25-(OH)D水平，对ELISA方法学进行系统评价，结果发现，ELISA测定25-(OH)D的批内CV为2.13%～4.32%，批间CV<5%，定值质控品相对偏差≤8%，拟合曲线相关系数R²≥0.99，最低检出限为5 nmol/L ......