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编号:11505420
重组人VEGF基因对游离组织移植物血管形成的作用(2)
http://www.100md.com 2007年10月1日 《中国美容医学》 2007年第10期
重组人VEGF基因对游离组织移植物血管形成的作用

     1.3.1皮片组:在大鼠背部两侧各作一3cm×2cm大小皮片,保留完整的皮下血管网,将含VEGF基因的脂质体100μg稀释成1000μl,10等份,每个皮片内选择均匀分布的5个点各注射100μl,受区皮下分5点各注射100μl,对照组同样方法各注射PCD及生理盐水1000μl,皮片左右交换位置后移植于对侧,缝合打包固定。术后24h处死动物4只,切取皮肤及皮下组织标本做成石蜡块,术后7天、14天分别取4只动物,处死动物切取标本,做成石蜡块。

    1.3.2皮瓣组:以腹壁下动脉为中轴,设计并形成一5cm×2.5cm的皮瓣,将含VEGF基因的脂质体100μg稀释成1000μl,10等份,每个皮瓣内选择均匀分布的5个点各注射100μl,受区皮下分5点各注射100μl,对照组同样方法各注射PCD及生理盐水1000μl,止血,缝合皮肤切口。术后第4天麻醉后,显露大鼠腹壁下动静脉并结扎,缝合切口,术后12h处死动物4只,切取标本。术后7天、14天分别取4只动物,处死动物切取标本,做成石蜡块。

    1.3.3 游离脂肪组:取腹股沟区脂肪0.2g,均匀剪成20小块,脂肪用生理盐水洗两次,剪碎,将100μg VEGF基因加生理盐水稀释成1ml,与剪碎的脂肪均匀混合,注射于皮肤与其下的肌肉之间。对照组同样方法以PCD及生理盐水1ml与脂肪混合注射。动物于第3天,第7天和第14天处死并分离出移植物,标本用10%福尔马林固定,常规制成石蜡切片。

    1.4血管染色及计数方法:CD34单克隆抗体作为第一抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司产品) ......
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