2.2 显微镜下观察：HE染色可见A、B组冻干异体骨关节面表面软骨组织吸收、裂解，局部破碎，软骨陷窝处未见软骨细胞存活，关节面处无新生软骨层。B、C组关节腔内获得的类软骨样结构镜下可见典型软骨光镜下结构特点，软骨陷窝内见活性细胞结构，细胞周边为均匀的软骨基质成分，软骨样结构边缘可见纤维结缔组织成分(图3)。D组镜下可见新生软骨样结构修复原自体关节面软骨层孔洞缺损，新生软骨样组织与原自体关节孔洞缺损边缘有较明显组织学外观差异，细胞形态较幼稚，但两者粘合紧密(图4)。II型胶原免疫组化染色均观察到B、C组及D组HE染色显微镜下观察到的软骨结构II型胶原棕褐色反应，为阳性染色结果，证实新生物中存在特异性软骨基质成分。

    3讨论

    支架材料是构建组织工程软骨的物质基础。软骨种子细胞的培养与扩增对微环境有特殊的要求。支架材料要能为种子细胞提供一个三维生长环境，使种子细胞在其中繁殖、生长、代谢，发挥细胞间的信号调控作用，不断分泌细胞外基质，以逐步取代降解的支架材料，最终形成有活性的软骨组织。

    关节软骨为透明软骨，组织学特点为软骨陷窝周边为大量软骨基质成分，形成较均匀紧密的结构，故即使经深低温冷冻干燥处理，冻干骨关节的关节软骨面组织仍然无法形成组织工程细胞培养所需的三维腔隙结构，总体孔隙率不足以提供细胞生长、增殖、物质交换所需的三维空间需求 ......